一、复方仙酥胶囊对人胃癌细胞凋亡及细胞周期的影响（论文文献综述）
陈晓静[1]（2021）在《益气消症颗粒联合化疗治疗气虚血瘀痰凝型晚期胃癌的临床研究》文中提出目的本研究通过观察益气消症颗粒联合化疗治疗气虚血瘀痰凝型晚期胃癌的临床疗效及安全性,并运用统计学方法对患者治疗后在实体瘤客观疗效、KPS评分、肿瘤标志物、中医证候积分及不良反应发生情况方面进行分析,为晚期胃癌的临床治疗提供新的思路。方法本研究采用随机对照方法,将已收集的68例晚期胃癌患者按随机数字表法随机分为治疗组34例和对照组34例,治疗组给予益气消症颗粒联合阿帕替尼和卡培他滨片治疗,对照组给予阿帕替尼和卡培他滨片治疗,21天为一周期,每2周期评估一次疗效,治疗4周期结束后对两组患者的实体瘤客观疗效、体力状况评分（KPS评分）、胃癌相关肿瘤标志物（CEA、CA199）、中医证候评分以及安全性指标,运用SPSS26.0进行统计学分析。结果本研究共纳入68例患者,治疗组脱落2例,对照组剔除、脱落3例,最后治疗组剩余有效病例32例,对照组剩余有效病例31例。（1）在实体瘤客观疗效方面,治疗组的客观缓解率和疾病控制率分别为40.63%,87.5%;对照组的客观缓解率和疾病控制率分别为32.26%,77.42%。虽治疗组的客观缓解率和疾病控制率均高于对照组,但两组间差异无统计学意义（P>0.05）。（2）在体力状况方面比较,治疗组治疗前后组内差异具有统计学意义（P<0.01）,对照组治疗前后组内比较,差异无统计学意义（P>0.05）,治疗后治疗组与对照组进行组间比较,差异有统计学意义（P<0.01）。（3）在降低肿瘤标志物CEA、CA199方面,治疗后治疗组与对照组进行组间比较,差异均无统计学意义（P>0.05）;治疗组治疗前后CEA水平,差异具有统计学意义（P<0.01）,对照组治疗前后组内比较CEA水平,差异有统计学意义（P<0.05）。（4）在中医证候疗效方面,对中医证候总体疗效评价,治疗组治疗后中医证候改善有效率为81.3%,对照组为64.5%,经秩和检验,差异有统计学意义（P<0.05）。对中医单项证候积分进行分析,治疗后治疗组患者胃脘痛、腹胀、恶心呕吐、神疲乏力、食少纳呆、便溏方面的中医证候积分均明显低于对照组,差异有显着统计学意义（P<0.01）。（5）在不良反应方面:对两组患者治疗后进行组间比较,治疗组不良反应发生率均不同程度上低于对照组,在高血压方面、白细胞减少、血小板减少方面,差异有统计学意义（P<0.05）。结论益气消症颗粒联合阿帕替尼和卡培他滨片治疗晚期胃癌与单使用阿帕替尼和卡培他滨片相比,在改善患者胃脘痛、腹胀、恶心呕吐、神疲乏力、食少纳呆、便溏方面以及改善患者的体力状况方面具有明显优势,能提高晚期胃癌患者的客观缓解率和疾病控制率,不良反应发生率均不同程度降低。由此可知,益气消症颗粒联合阿帕替尼和卡培他滨片能改善晚期胃癌患者的临床症状,提高患者的生活质量,且能减轻阿帕替尼和卡培他滨片的不良反应,安全性高,可供临床使用。
张燕娜[2]（2021）在《含斑蝥制剂联合化疗治疗胃癌疗效及安全性的Meta分析与考证研究》文中认为研究背景胃癌是常见的消化系统恶性肿瘤之一,是严重威胁健康的一种疾病。中药在防治肿瘤相关并发症及不良反应方面有一定的经验,斑蝥就是其中一种。斑蝥具有破血逐瘀,散结消症,攻毒蚀疮的功效。目前已经有多种含斑蝥及斑蝥提取制剂的上市药品,相关制剂在临床上的应用也较多,尤其是肿瘤方面,主要有斑蝥酸钠维生素B6注射液、艾迪注射液、复方斑蝥胶囊等。含有斑蝥的制剂,联合胃癌特定化疗方案能否改善患者的生活质量,生存状况,以及属于大毒的中药斑蝥,引起的不良反应,历代应用过程中的侧重等,均有待探讨。本研究基于Meta分析,探讨含斑蝥的中药制剂联合化疗较单纯化疗治疗胃癌疗效及安全性,给临床上胃癌的辅助治疗提供参考;文献研究部分通过归纳及比较法,对斑蝥历代医籍中性味归经、功效特点等进行对比分析,得出斑蝥用药及配伍规律的演变情况。研究目的1.通过Meta分析,评价含斑蝥制剂联合化疗较单纯化疗治疗胃癌的疗效及安全性。2.历代斑蝥的药性及功效演变探讨。研究方法1.Meta分析通过检索中国知网数据库（CNKI）,万方数据库,维普中文科技期刊数据库（VIP）,中国生物医学文献数据库（CBM）,英文数据库主要检索Web of Science,Spring,PubMed,Embase,Cochrane,时间限制在2010年1月1日至2020年12月31日,对含有斑蝥的中药制剂,联合特定化疗方案,治疗胃癌的临床随机对照试验进行收集,对文献质量进行评价,并提取一般情况,方法学内容,干预措施内容,结局指标内容,使用Review Manager5.4软件进行Meta分析。2.文献研究通过检索《中华医典》及北京中医药大学图书馆馆藏书籍,搜集含有斑蝥的中医书籍,并将其进行整理。通过归纳及比较法,对斑蝥历代医籍中性味归经、功效特点等进行对比分析,得出斑蝥用药及配伍规律的演变情况。研究结果1基于Meta分析的临床评价研究1.1文献检索结果符合纳排标准的文献全部为已发表的中文文献,发表时间为2010-2020年,均为中国患者,共15篇,其中,艾迪注射液12篇,复方斑蝥胶囊2篇,斑蝥酸钠维生素B6注射液1篇;按化疗方案分,其中FOLFOX方案5篇,SOX方案2篇,XELOX方案3篇,替吉奥单药3篇,卡培他滨单药2篇。1.2纳入研究的基本特征将第一作者姓名和发表年份定义为研究ID,15篇研究中患者总计987例,试验组501例,对照组486例,男性609例,女性378例。1.3纳入研究的质量评价采用Cochrane系统评价手册6.2进行质量评价,15项研究均提及随机,9项研究未提及具体随机方法;分配隐藏方面,9项研究风险不清楚,6项研究为高风险;15项研究均未提及盲法;1项研究存在失访;3项研究存在选择性报告研究结果;15项研究其他偏倚不清楚。1.4 Meta分析结果1.4.1疾病客观缓解和控制疾病客观缓解率方面,6项研究以RECIST标准进行疗效评价,异质性检验显示,P=0.74,I2=0%,采用固定效应模型,Meta分析显示,试验组缓解高于对照组,有统计学意义（RR=1.56,95%CI:1.22～1.99,P=0.0004）。7项研究以WHO标准进行疗效评价,异质性检验显示,P=0.30,I2=17%,采用固定效应模型,Meta分析显示,试验组缓解高于对照组,有统计学意义（RR=1.24,95%CI:1.03～1.49,P=0.02）。疾病控制率方面,6项研究以RECIST标准进行疗效评价,异质性检验显示,P=0.30,I2=17%,采用固定效应模型,Meta分析显示,试验组疾病控制率高于对照组,有统计学意义（RR=1.17,95%CI:1.05～1.31,P=0.005）。7项研究以WHO标准进行疗效评价,异质性检验显示,P=0.29,I2=18%,采用固定效应模型,Meta分析显示,试验组和对照组在疾病控制率方面,无统计学意义（RR=1.06,95%CI:0.98～1.14,P=0.14）。1.4.2生存状况2项研究报道了 2年生存率,进行异质性检验,P=0.97,I2=0%,采用固定效应模型,Meta分析显示,试验组和对照组2年生存率未见明显差异。1.4.3生活质量共有6项研究报告了患者的生活质量。2项研究采用KPS进行生活质量评分,4项研究以治疗前后KPS提高大于10分为改善。将KPS评分,进行异质性检验,P=0.73,I2=0%,采用固定效应模型,Meta分析显示,试验组KPS评分高于对照组,有统计学意义（MD=5.85,95%CI:4.21～7.49,P<0.00001）。KPS改善情况,进行异质性检验,P=0.93,I2=0%,采用固定效应模型,Meta分析显示,试验组KPS改善情况高于对照组,有统计学意义（RR=2.51,95%CI:1.80～3.51,P<0.00001）1.4.4临床副作用白细胞降低,进行异质性检验,P=0.007,I2=62%,采用随机效应模型,Meta分析显示,试验组白细胞降低低于对照组,有统计学意义（RR=0.52,95%CI:0.38～0.70,P<0.0001）。血小板降低,进行异质性检验,P=0.57,I2=0%,采用固定效应模型,Meta分析显示,试验组血小板降低低于对照组,有统计学意义（RR=0.54,95%CI:0.41-0.70,P<0.00001）。血红蛋白降低,进行异质性检验,P=0.14,I2=45%,采用固定效应模型,Meta分析显示,试验组血红蛋白降低低于对照组,有统计学意义（RR=0.69,95%CI:0.51～0.94,P=0.02）。恶心呕吐,进行异质性检验,P=0.02,I2=60%,采用随机效应模型,Meta分析显示,试验组发生率低于对照组,有统计学意义（RR=0.69,95%CI:0.55～0.86,P=0.001）。肝功能损伤,进行异质性检验,P=0.96,I2=0%,采用固定效应模型,Meta分析显示,试验组肝功能损伤低于对照组,有统计学意义（RR=0.32,95%CI:0.18-0.58,P=0.0001）。2文献研究关于斑蝥的寒热属性,《神农本草经》认为其“味辛,寒”,张景岳认为其属“热”。大部分医籍认为斑蝥属于辛味,还有人认为属于咸或甘。结合斑蝥的作用特性,能够软坚散结,且咸“能下、能软”,认为斑蝥味属“辛、咸”。斑蝥的归经,有人认为归手太阴、阳明、太阳、足太阴经,有人认为入肺、脾二经,还有人认为归足厥阴经。《冯氏锦囊秘录》将其归属于“手阳明、手太阳经”。斑蝥炮制,目前大多将斑蝥与米炒至黄棕色,去头、翅、足后使用。配伍及应用方面,以实证为主,虚证使用时应审慎,内服需慎用,必要时配伍其他中药以佐制。研究结论1.含有中药斑蝥制剂联合特定化疗方案较单纯化疗方案,可提高胃癌患者客观缓解率,改善其生活质量,减轻不良反应发生,但2年生存率,疾病控制率未见明显提高,可能与纳入文献较少,质量较低有关,需进一步研究。2.文献研究方面,认为斑蝥味辛、咸,性热,归肝、肾、胃、大小肠经,功效方面在破血逐瘀,散结消症,攻毒蚀疮基础上,增加通利水道。斑蝥有大毒,临床中仍需结合具体情况,辨证论治,审慎用药。
戴小军[3]（2020）在《运化毒邪方及其有效成分控制胃癌的研究》文中研究指明引言胃癌是严重危害人民健康及生命的消化道恶性肿瘤,胃癌发病率在全球范围恶性肿瘤中位居第4位,在我国发病率位居第2位,在江苏扬州恶性肿瘤死亡率中位居第1位。我国胃癌患者处于晚期居多,治疗效果较差,预后不佳,治疗手段以化疗为主。但是晚期胃癌患者身体一般情况差,加上化疗药物对消化道、骨髓功能、免疫系统、肝脏、肾脏等的毒副反应,患者化疗耐受性差,如何优化化疗的用药,是肿瘤临床医师重要工作。中药复方和化疗药物的联用,可以减毒增效,提高生活质量,延长生存期。依据胃癌患者运化功能差,对毒邪的转运、排泄、化灭等功能的不畅,运化毒邪方是多年来根据胃癌自身特点所自主创新研发的治疗胃癌的药方（由黄芪、人参、炒白术、炒苡仁、蛇舌草、莪术、龙葵、蒲公英、茯苓、炙甘草组成）。课题在构建中医肿瘤数据样本库、胃癌人源性癌组织移植瘤模型等关键技术的基础上,从临床、细胞、动物水平系统研究了运化毒邪方抗胃癌的作用,及从Claudin-4/VEGF-C/GSK3β信号网络调控初步研究运化毒邪方可能的抗胃癌作用机制。进一步分析了运化毒邪方化学成分,选取活性成分之一人参皂苷Rg3进行抗胃癌研究,并从剂型改造上（VEGFR-3抗体结合人参皂苷Rg3纳米乳剂）提高人参皂甙Rg3“运”的能力,提高“化”的作用,进一步完善运化思想治疗胃癌。本课题共分为六部分研究内容。第1章:从毒邪治疗胃癌理论架构1.1毒邪理论治疗肿瘤源流及辨治要法从毒邪论治是肿瘤治疗的核心问题之一,本文系统梳理了从毒邪理论治疗肿瘤的源流:秦汉时期是毒邪学说论治肿瘤的萌芽期,晋隋唐宋时期大致构建了毒邪学说的框架,即毒邪的分类、内涵、病因病机特点。明清时期进一步认识到外感疫毒这一因素,现代以来多位医家提出“癌毒”这一概念。恶性肿瘤的治疗应在扶正祛邪的总体治疗原则下,特别重视毒邪这一重要病理因素,根据毒邪在恶性肿瘤发生发展过程中的证素、证候特征,病机规律等,阐述了扶正祛毒、清热解毒、理气排毒、祛瘀化毒、化痰散毒、祛风摄毒、泄浊解毒、安邪休毒、灭虫化毒、以毒攻毒等十种抗肿瘤的辨治法则,同时结合现代科学研究成果,逐步完善从毒邪论治恶性肿瘤的理论体系的框架结构。1.2基于“脾主运化”理论论治胃癌基于经典中医理论及医学科学不断发展,胃癌与“脾主运化”理论存在密切的联系。从脾主运化的理论渊源,脾失运化、毒邪侵犯的胃癌病机,从脾主运化论治胃癌方略等角度进行探讨,以期提高诊治胃癌疗效、改善胃癌预后。第2章 运化毒邪方对进展期胃癌复发转移干预的临床研究目的:探讨运化毒邪方干预进展期胃癌患者的临床疗效,观察运化毒邪方干预治疗对胃癌患者血清代谢物及代谢通路的影响。方法:以中医肿瘤网页版信息数据库为依托,对中医肿瘤病人信息进行结构化设计,整合患者基本信息、中医临床信息等相关信息,实现在线查询统计功能。选取2016年2月-2019年3月扬州市中医院收治的98例晚期胃癌患者为研究对象。采用同期对照、非随机临床研究方法,将符合标准病例纳入中药组和化疗组,每组各49例。对照组采用奥沙利铂、替吉奥方案,中药组在对照组的基础上口服运化毒邪方。16例患者血清样本进行衍生化处理,在气相色谱-飞行时间质谱（GC-TOFMS）检测器分析。结果:经中医药、化疗治疗4个疗程后评价,治疗后化疗组PR为19例,SD为17例,临床有效率为38.77%,疾病控制率为73.47%;中药组PR为24例,SD为21例,临床有效率为48.98%,疾病控制率为91.84%,两组比较差异有统计学意义（P<0.05）;治疗后中药组KPS、ECOG评分显着升高,CEA、CA199、CA724水平均显着降低,两组治疗前后比较差异具有统计学意义（P<0.05）;中药组肝肾功能损伤、胃肠道反应、骨髓抑制的不良反应发生情况均低于对照组,两组比较差异有统计学意义（P<0.05）;化疗组患者的一年生存率明显低于中药组,两组比较差异有统计学意义（P<0.05）;中医药干预、年龄、体重、TNM分期、卡氏评分、手术方式等因素与进展期胃癌的无进展生存期相关,中药治疗、手术方式、体重为影响进展期胃癌的生存期的独立性相关因素。运化毒邪方干预胃癌治疗,主要涉及半乳糖代谢通路、支链氨基酸代谢通路,干预L-异亮氨酸、L-丝氨酸、L-亮氨酸、D-半乳糖、蔗糖、3-甲基-2-氧代戊酸的代谢结论:运化毒邪方治疗可以延长进展期胃癌患者生存期、提高生活质量、减轻“奥沙利铂、替吉奥”方案化疗毒副反应,是进展期胃癌预后的独立保护性因素,对胃癌患者血清代谢组学影响主要涉及半乳糖代谢通路、支链氨基酸代谢通路。第3章:运化毒邪方对胃癌生长及介导Claudin-4调控上皮间质转化信号通路的作用目的:探讨运化毒邪方对胃癌细胞及胃癌人源肿瘤异种移植瘤生长及相关蛋白和mRNA表达的影响。方法:MTT比色法检测对运化毒邪方人胃癌细胞增殖能力的影响,划痕实验检测细胞迁移,建立胃癌人源肿瘤异种移植（Patient-Derived tumor Xenograft,PDTX）模型,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测 GSK3β、VEGF-C、Claudin-4 蛋白表达,qPCR 检测 GSK3β、VEGF-C、Claudin-4 mRNA 的表达。结果:运化毒邪方1、2、4、8、16、32 mg/mL处理24、48 h,细胞呈不同程度的生长抑制作用,并且有一定的浓度依赖性。与空白组比较,运化毒邪方3、6 mg/mL 干预 AGS、BGC-803、SGC-7901 细胞 24h 后,运化毒邪方 3、6mg/mL组划痕距离明显降低（P<0.05）。运化毒邪方高剂量组的平均肿瘤体积与阴性对照组相比较,有明显差异,并且统计学分析上有明显差异;运化毒邪方低剂量组和运化毒邪方中剂量组的平均肿瘤体积与阴性对照组相比较,有降低趋势,但统计学分析上没有明显差异。运化毒邪方高剂量组的平均肿瘤重量与阴性对照组相比较,有明显差异,并且统计学分析上有明显差异。运化毒邪方干预后AGS、BGC803、SGC7901细胞及肿瘤组织中GSK3β蛋白及mRNA的表达水平增加,VEGF-C、Claudin-4蛋白及mRNA的表达水平降低。结论:运化毒邪方可通过抑制上皮间质转化相关蛋白的表达水平和促进抑癌基因相关蛋白的表达水平来共同发挥抑制胃癌生长、侵袭力和转移力的作用。第4章:基于高效液相色谱-质谱（HPLC-MS）联用技术的运化毒邪方化学成分研究目的:分析运化毒邪方的化学成分,探讨其发挥药效的化学成分。方法:按照运化毒邪方处方中草药比例制备水煎液,采用HPLC-MS联用技术鉴定水煎液中的化学成分。结果:运化毒邪方水煎液在正负离子模式下共检测到1 12种化学活性成分,其中质谱响应强度大于50000的活性成分共有59种,按质谱响应强度排序依次为:甘草苷、芹糖甘草苷、芹糖异甘草苷、芒柄花苷、甘草酸、7-羟基-4’-甲氧基异黄酮、4’,7-二羟基黄酮、2’,4,4’-三羟基查耳酮、甘草素、异甘草素、甘草醇、毛蕊异黄酮、（3R）-2’,3’-二羟基-7,4’-二甲氧基异黄酮、汉黄芩素、樱黄素、芫花素、芒柄花素、人参黄酮忒、芸香苷、绿原酸、人参皂苷Ro、对-香豆酸、人参皂苷Rg7、人参皂苷Rf、人参皂苷Rg1、珠子参甙F2、珠子参甙F4、槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷、异槲皮苷、东茛菪素、东莨菪内酯、人参皂苷Rg3、人参皂苷F2、人参皂苷Rg2、穿心莲内酯、α-檀香醇、木犀草素、蒙花忒、姜黄素、甘草香豆素、咖啡酸、三叶豆甙、人参皂苷R2、人参皂苷F3、竹节皂苷L8、半甘草异黄酮B、柚皮苷、人参皂苷Rb1、白术内酯、人参皂苷Rd、人参皂苷Re、绞股蓝皂苷ⅩⅦ、棕榈酸、十六酸、茯苓新酸G、24-羟基甘草次酸甲酯、人参皂苷Rh4、人参皂苷Rk3、甘草次酸。经液相测试,样品中人参皂苷Rg3的含量为 3.67ppm。结论:运化毒邪方含有人参皂苷Rg3等皂苷类31种,黄酮类也有三十多种。第5章:运化毒邪方主要活性成分之一人参皂苷Rg3对胃癌生长及Claudin-4/VEGF-C/GSK3β 通路调控作用目的:运化毒邪方主要组成药物之一即为人参,人参皂苷Rg3是中药材人参的主要活性成分之一,探讨人参皂苷Rg3抗胃肿瘤作用及可能机制。方法:MTT比色法检测对人胃癌细胞（AGS、BGC-803、SGC-7901）增殖能力的影响,划痕实验检测细胞迁移,建立胃癌人源肿瘤异种移植模型,Western blot、qPCR 检测 Claudin-4/VEGF-C/GSK3β通路蛋白及 mRNA 的表达。结果:人参皂苷Rg3 1、2、4、8、16、32mg/L处理胃癌细胞24、48h,细胞呈不同程度的生长抑制作用。人参皂苷Rg3给药24 h后,对SGC-7901、AGS、BGC-803细胞的生长呈明显抑制作用,24h IC50值依次分别为12.48、31.53、13.05mg/mL。4、8mg/L 的人参皂苷 Rg3 干预 BGC-803、AGS、SGC-7901 细胞 24 h后,划痕距离明显降低。应用人参皂苷Rg3高剂量组（20mg/kg）的平均肿瘤重量与阴性对照组相比较,有明显差异,并且统计学分析上有明显差异。与对照组比较,AGS、BGC-803、SGC-7901细胞经过人参皂苷Rg3 4、8mg/L作用24 h后,荷瘤裸鼠人参皂苷Rg3低、高剂量（10mg/kg、20mg/kg）,随着药物质量浓度的增加,AGS、BGC803、SGC7901细胞及肿瘤组织中GSK3β蛋白及mRNA的表达水平增加,VEGF-C、Claudin-4蛋白及mRNA的表达水平降低。结论:运化毒邪方中有效成分之一人参皂苷Rg3的有抗胃癌作用及对Claudin-4/VEGF-C/GSK3β信号通路有一定调节作用。特别是人参皂苷Rg3对胃癌人源动物模型有抗肿瘤作用,进一步证实人参皂苷Rg3对人体胃癌抑制作用的可靠性。第6章:VEGFR3靶向性纳米人参皂甙Rg3对原位胃癌小鼠移植瘤的影响目的:本研究的目的是研究VEGFR3靶向性纳米人参皂甙Rg3（VEGFR3-mediatedimmune-nanoemulsion of ginsenoside Rg3,VRIN）对原位胃癌小鼠肿瘤生长和转移的抑制作用。方法:建立了裸鼠原位胃癌模型用红色荧光蛋白（RFP）表达人胃癌细胞系NUGC-4-RFP。用溶媒处理荷瘤小鼠（0.2ml生理盐水,每隔一天,静脉注射）,5-FU（20mg/kg,每周一次,静脉注射）和VRIN（每隔一天1 mg/kg,静脉注射）。实时荧光对各组进行影像学检查以评估肿瘤抑制情况。用开放式荧光成像技术评估转移情况。采用免疫组化和实时RCP法检测肿瘤组织中VEGF-C、VEDF-D和VEGFR-3的表达。结果:VRIN和5-FU显着抑制原发性肿瘤的生长（p<0.05）。然而,显着抑制淋巴结转移仅见于VRIN治疗组（p<0.05）。与生理盐水组对比,VRIN治疗可抑制肿瘤中 VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3 的表达（p<0.05）;VEGF-D 和VEGFR-3在5-FU组表达无显着性差异（p>0.05）。VRIN组和5-FU组均无明显毒性。结论:VEGFR3靶向性纳米人参皂甙Rg3能抑制胃癌生长,通过抑制VEGF-C、VEGF-D和VEGFR-3的表达降低淋巴转移。研究显示了中医药可有效靶向治疗转移性胃癌。
赵帅[4]（2020）在《九香虫血淋巴对小鼠乳腺癌移植瘤生长抑制作用》文中提出九香虫Aspongopus chinensis Dallas,1851为半翅目Hemiptera兜蝽科Dinidoridae药用昆虫,始记载于《本草纲目》;传统常用于支气管炎、胃痛、性功能障碍、子宫内膜异位症等多种疾病的治疗;现代医学证明其具有抗癌、抗菌等作用,其血淋巴可体外抑制人乳腺癌细胞、胃癌细胞的增殖。但其作为药物开发利用必须环节的动物模型研究（体内实验）仍不明确。本研究在进一步确认九香虫血淋巴对小鼠乳腺癌4T1细胞体外生长具抑制作用的基础上,开展了小鼠乳腺癌4T1移植瘤动物模型的构建、九香虫血淋巴及血淋巴和常规化疗药物顺铂联合用药对移植瘤体内生长的影响研究,明确了九香虫血淋巴体内、外对小鼠乳腺癌4T1细胞的作用效果和联合用药效果。具体研究方法及结果如下:1.九香虫血淋巴对小鼠乳腺癌4T1细胞体外生长的影响九香虫血淋巴作用于小鼠乳腺癌4T1细胞,通过形态学观察,发现九香虫血淋巴可促使乳腺癌细胞皱缩及漂浮细胞的增多;MTT法检测显示,九香虫血淋巴可显着抑制乳腺癌细胞的增殖,具有时间及浓度依赖性;Hoechst 33258染色法检测显示,随着九香虫血淋巴作用时间的增加,凋亡细胞比例增加;流式细胞术检测显示,随着九香虫血淋巴浓度的升高,S期细胞比例显着性增多,G1期细胞比例显着性减少,显着阻滞乳腺癌细胞于S期。2.九香虫血淋巴灌胃给药对小鼠乳腺癌移植瘤体内生长的影响构建小鼠乳腺癌移植瘤动物模型,通过观察治疗期间乳腺癌瘤体及小鼠体重的变化,血常规观察血细胞变化,瘤体及肝、脾、肺、肾重量变化,H&E染色观察组织结构变化,探究不同浓度九香虫血淋巴灌胃用药对乳腺癌移植瘤的影响。结果显示,九香虫血淋巴灌胃给药抑制乳腺癌移植瘤生长抑制效果不明显,对小鼠生长状态及肝、脾、肺、肾无明显影响;对顺铂抑制乳腺癌肿瘤效果及引起的小鼠体重、肝、脾减轻的副作用,联合用药无明显增效减毒作用。3.九香虫血淋巴腹腔注射给药对小鼠乳腺癌移植瘤体内生长的影响利用2中方法开展了九香虫血淋巴腹腔注射给药对小鼠乳腺癌移植瘤体内生长的影响研究,并利用Hoechst 33258染色观察了肿瘤组织凋亡,探究腹腔注射不同浓度九香虫血淋巴对乳腺癌移植瘤的影响。结果显示九香虫血淋巴腹腔注射给药可显着抑制乳腺癌移植瘤的生长,诱导肿瘤组织细胞的凋亡;可缓解顺铂引起的小鼠体重、肝、脾减轻及血小板减少的副作用,但不能明显增强顺铂抑制乳腺癌肿瘤的效果。综上:九香虫血淋巴体内、外具有良好的抗乳腺癌活性,对生物体本身无明显毒副作用,且可以缓解部分抗癌药物产生的毒副作用。
解广东[5]（2020）在《四虫片对胃癌细胞生物学行为及瘀毒交阻型胃癌术后患者的影响和网络药理学研究》文中进行了进一步梳理目的探讨中药四虫片对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其作用机制,观察四虫片对瘀毒交阻型胃癌术后患者的临床疗效,并进一步通过网络药理学方法分析四虫片治疗胃癌的潜在分子生物学机制。方法1.实验研究:采用CCK-8法检测不同浓度（0μg/ml～500μg/ml）四虫片作用48h时,对人胃癌AGS和MKN45细胞增殖的影响,计算增殖抑制率和IC50值;选用合适的四虫片浓度,并设定对照组,采用CCK-8法和克隆形成实验检测四虫片对胃癌细胞增殖的影响,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,划痕实验和Transwell小室法检测细胞的迁移和侵袭能力,Western blot法检测四虫片对凋亡相关蛋白Bax、Bcl2、C-Caspase 3、α-tubulin的表达水平及AKT/Cyclin D1细胞信号通路的影响,采用明胶酶谱法检测四虫片对MMP9活性的影响。2.临床研究:纳入64例瘀毒交阻型胃癌术后患者随机分为治疗组和对照组,对照组给予OLF化疗方案进行化疗,治疗组在此基础上给予四虫片口服,观察3个化疗周期,对比两组治疗前后在中医症状评分、卡氏评分（KPS）、淋巴细胞亚群、肿瘤标志物水平、循环肿瘤细胞（CTC）数量及化疗不良反应方面的差异,随访患者,观察两组患者在无病生存期（DFS）方面的差异,并对结果进行统计分析。3.网络药理学研究:从中国知网（CNKI）、中国生物医学文献（CBM）、维普、万方、Pub Med、Coremine数据库中检索四虫片中全蝎、蜈蚣、土鳖虫、地龙的所有化学成分,再通过CNKI、CBM、TCMSP、TCM Database@Taiwan、CTD数据库检索化学成分所对应的靶点,通过CNKI、CBM、Pub Med、Gene Cards、OMIM数据库检索与胃癌治疗相关的靶点,筛选共同作用靶点,利用Cytoscape构建成分-靶点-疾病网络,利用String数据库构建蛋白-蛋白作用网络,利用Cyto NCA插件对核心靶点进行网络拓扑分析,利用R程序包对核心靶点进行功能（GO）富集分析,利用Clue GO插件进行KEGG通路富集分析。结果1.实验研究:随着四虫片作用浓度的增加,胃癌AGS和MKN45细胞的增殖抑制率逐渐升高,在作用48h时,AGS和MKN45细胞的IC50值分别为240μg/ml和200μg/ml,研究选用80μg/ml作为四虫片组药物作用浓度进行后续实验;在细胞增殖实验中,四虫片组在48h、72h时对AGS和MKN45细胞的抑制水平均显着高于对照组（P<0.05）,并呈时间依赖性,同时四虫片显着减弱了胃癌AGS和MKN45细胞的克隆形成能力（P<0.05）;在细胞凋亡研究中,四虫片组AGS和MKN45细胞的凋亡比例分别为（23.44±1.2）%和（24.76±2.1）%,均显着高于对照组中的凋亡比例（4.03±0.23）%和（4.63±0.31）%;与对照组相比,四虫片组AGS和MKN45细胞的凋亡相关蛋白Bcl2、C-Caspase 3表达显着降低,Bax表达及Bax/Bcl2比值显着升高（P<0.05）;在划痕实验中,四虫片组胃癌AGS和MKN45细胞愈合面积比例显着低于对照组P<0.05);在Transwell实验中,四虫片组胃癌AGS和MKN45细胞的迁移和侵袭细胞数量均显着少于对照组（P<0.05）,且迁移及侵袭相关蛋白MMP9的活性显着低于对照组（P<0.05）;在细胞信号通路检测中,与对照组相比,四虫片组显着降低了AGS和MKN45细胞的AKT磷酸化水平以及下游效应子Cyclin D1的表达水平。2.临床研究:有效评价患者共61例,治疗组30例,对照组31例。在中医症状评分方面,治疗组在治疗后的总评分显着低于对照组,其中治疗组显效6例,有效19例,对照组显效4例,有效12例,治疗组有效率显着高于对照组（P<0.05）;治疗组KPS改善19例,稳定6例,对照组改善10例,稳定13例,治疗组KPS改善情况明显优于对照组（P<0.05）;治疗组在治疗后CD4+T、CD4+/CD8+值、NK细胞的比例均明显高于对照组（P<0.05）,在治疗后CEA、CA19-9、CA125、CA72-4的水平均明显低于对照组（P<0.05）;治疗后,两组间CTC数量无显着性差异（P>0.05）;治疗组化疗不良反应的发生例数显着少于对照组（P<0.05）;在随访周期内,治疗组DFS时间为（15.33±5.78）月,对照组DFS时间为（12.48±4.97）月,治疗组明显长于对照组（P<0.05）。3.网络药理学研究:经检索得到四虫片200种活性成分,499个药物潜在靶点,四虫片中活性成分主要有Adenosine、4,7,10,13,16,19-docosahexaenoic acid、Uridine、alanine、Bm K M1 neurotoxin、Phenol、5,8,11,14-Eicosatetraenamide、Batyl alcohol、hypoxanthine、Dihydrocapsaicin等能够发挥治疗胃癌的功效;在疾病数据库中检索并筛选共得到胃癌相关的1227个靶点,取交集得到共同作用靶点155个,应用网络拓扑分析筛选出152个核心靶点,主要涉及NTRK1、TP53、EGFR、CUL3、XPO1、ESR1、MCM2、UBC、FN1、HSP90AA1等,GO富集分析得到157条功能区域,其中基因富集数量>10的功能有28条,主要包括细胞粘附、mRNA的转录、DNA的结合、蛋白的合成及转运等,KEGG富集得到75条信号通路,富集基因数量>10的功能有39条,主要涉及到病毒致癌信号通路、肿瘤的信号通路、肿瘤转录失调信号通路、细胞周期信号通路、PI3K-Akt信号通路、泛素介导的蛋白水解信号通路等。结论1.四虫片能（1）显着抑制人胃癌AGS和MKN45细胞的增殖,并与作用浓度、时间相关,（2）诱导人胃癌AGS和MKN45细胞的凋亡,其可能机制是通过下调Bcl2及上调Bax、C-Caspase 3等凋亡相关蛋白的表达来实现的,（3）抑制人胃癌AGS和MKN45细胞迁移和侵袭,其机制可能与抑制迁移及侵袭相关蛋白MMP9的活性有关,（4）引起AKT磷酸化水平降低以及下游效应因子Cyclin D1的表达降低,并可能通过这种机制影响胃癌细胞的生物学行为。2.在3个月的治疗周期内,四虫片能显着改善瘀毒交阻型胃癌术后患者的中医症状、生活质量、机体淋巴细胞亚群,降低患者的肿瘤标志物水平,减少化疗不良反应的发生等,在随访周期内,能明显延长患者的DFS。3.四虫片是通过多靶点、多途径、相互协调、相互影响来治疗胃癌的,主要活性成分通过干预细胞粘附、mRNA的转录、DNA的结合、蛋白的合成及转运等功能发挥抗肿瘤功能,并通过影响细胞周期类信号通路等发挥对胃癌的治疗作用,主要涉及病毒致癌信号通路、肿瘤的信号通路、肿瘤转录失调信号通路、细胞周期信号通路、PI3K-Akt信号通路、泛素介导的蛋白水解信号通路、乙型肝炎信号通路、酒精依赖信号通路、人乳头瘤病毒感染信号通路、MAPK信号通路、丙型肝炎信号通路、肿瘤Micro RNA信号通路、肿瘤蛋白聚糖信号通路等,充分体现了四虫片在治疗胃癌中的整体性和系统性特点。
郑佳彬[6]（2020）在《复方苦参注射液对恶性T细胞淋巴瘤作用机制研究》文中指出立题依据:研究背景:恶性淋巴瘤（ML）是一组起源于淋巴系统的恶性肿瘤,多发生于淋巴结和（或）结外部位淋巴组织,通过肿瘤细胞表面的白细胞分化抗原不同可将其分为T细胞来源淋巴瘤及B细胞来源淋巴瘤两大类。T细胞淋巴瘤临床较B细胞淋巴瘤较为少见,仅约占所有淋巴瘤的10%-15%。但这类淋巴瘤由于其亚洲人群高发病率、明显的个体异质性、广泛的症状特异性、较差的治疗预后和转归及大多数在治疗2-3年内复发的特点,也一直受到国内外学者的广泛重视。复方苦参注射液由于其抗肿瘤、镇痛、增强免疫等功效,常用于晚期患者的维持治疗及放化疗辅助治疗。中国中医科学院首席研究员、中国中医科学院广安门医院肿瘤科前主任林洪生教授在多年的淋巴瘤患者诊治过程中发现复方苦参注射液在治疗缓慢进展的T细胞淋巴瘤,尤以伴以多种形式皮肤损伤的患者效果显着,填补了缓慢进展或除皮肤受累症状外并无其他淋巴结或结外器官受累症状的患者等待观察期无药可用的空白,缓解了患者症状,显着改善生活质量。研究目的:本研究分别通过体内及体外实验设计,探索复方苦参注射液对不同人源淋巴瘤细胞系的干预作用,并在小鼠体内模型中进一步验证和探索其免疫调控作用机制。为复方苦参注射液临床有效性是否源于其对淋巴瘤抑制调节作用提供进一步科学依据。研究方法:1.复方苦参注射液对淋巴瘤细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响1.1复方苦参注射液对不同淋巴瘤细胞系增殖的影响及筛选分别培养Hut78（人源皮肤T细胞淋巴瘤细胞株）、Loucy（人源T淋巴细胞白血病细胞株）、Jurkat（人源T淋巴细胞白血病细胞株）、Raji（人源B细胞淋巴瘤细胞株）、EL4（鼠源T淋巴细胞白血病细胞株）5种不同淋巴瘤细胞株。通过比较CCK8及prestoblue敏感度及复方苦参注射液颜色带来的影响,选择prestoblue法作为细胞活力检测试剂。使用prestoblue法及细胞计数法重复验证不同浓度（0.039-5mg/ml）复方苦参注射液对不同细胞株干预后24h、48h、72 h、96h后对其增殖的影响。从而筛选增殖抑制有效及敏感的细胞株。1.2复方苦参注射液对T细胞淋巴瘤Hut78、Loucy细胞周期的调节作用对上一步筛选敏感细胞株Hut78、Loucy细胞采用PI染色,通过流式细胞仪检测细胞周期,分析不同剂量复方苦参注射液对细胞周期的调节作用。1.3复方苦参注射液对T细胞淋巴瘤Hut78、Loucy细胞凋亡的影响对敏感细胞株Hut78、Loucy细胞采用7AAD/AnnexinV双染色,流式细胞仪检测细胞凋亡率,分析不同剂量复方苦参注射液对细胞凋亡的诱导作用。并通过Western Blot法检测凋亡相关内切酶casepase3、casepase7表达进一步证实凋亡的发生。2.复方苦参注射液对Hut78、Loucy细胞信号调控通路蛋白表达的影响应用反向蛋白阵列术（RPPA）检测敏感细胞株Hut78经不同剂量复方苦参注射液干预24h后蛋白表达差异,聚类分析潜在作用通路,蛋白质印迹法（WB）验证相关有效通路蛋白在复方苦参注射液干预的Hut78、Loucy细胞蛋白表达中的影响,明确复方苦参注射液抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡等生物学行为的调控机制。3.复方苦参注射液对Hut78、Loucy细胞能量代谢的影响使用高压液相和质谱联用的方法定量检测敏感细胞株Hut78、Loucy经不同剂量复方苦参注射液干预24h后代谢产物表达差异,明确复方苦参注射液影响肿瘤细胞能量代谢生物学行为的调控机制。4.复方苦参注射液对EL4淋巴瘤动物模型的体内实验研究4.1复方苦参注射液对EL4淋巴瘤模型生存期的影响使用C57BL/6J小鼠构建EL4淋巴瘤动物模型,将荷瘤小鼠随机分为低、中、高剂量（2ml/kg、4ml/kg、8ml/kg）复方苦参注射液组,甲氨喋呤（MTX）组,生理盐水组以腹腔注射方式干预荷瘤小鼠14天,观察记录其对瘤体大小、小鼠体重及生存期的影响,探索CKI治疗的最佳剂量。4.2复方苦参注射液对EL4淋巴瘤模型免疫调节及肿瘤能量代谢的影响使用C57BL/6J小鼠构建EL4淋巴瘤动物模型,将荷瘤小鼠随机分为最佳剂量复方苦参注射液组（2ml/kg,4ml/kg）及生理盐水组以腹腔注射方式干预荷瘤小鼠7天,观察比较瘤体大小,绘制瘤体生长曲线;通过免疫细胞亚群测定检测小鼠肿瘤及脾脏免疫细胞分型表达;通过高压液相和质谱联用的方法进行肿瘤组织代谢产物检测。以进一步验证探索复方苦参注射液体内作用机制;小鼠肿瘤组织石蜡切片的制作及Cleave Casepase3 IHC染色用以检测肿瘤组织凋亡情况。以进一步验证探索复方苦参注射液体内作用机制。研究结果:1.通过细胞活力鉴定的方法学摸索,CCK8及Prestoblue均具有良好的敏感性,但复方苦参注射液颜色对Prestoblue读数的影响程度更小。因此选择prestoblue法及细胞计数法重复验证CKI在淋巴瘤细胞增殖中发挥的作用。Prestoblue法结果显示复方苦参注射液对5种淋巴瘤细胞均显示出生长抑制作用。其中T细胞淋巴瘤细胞系Hut-78、EL4、Loucy、Jurkat要显着强于B细胞淋巴瘤细胞Raji,在人源T细胞淋巴瘤细胞系中,复方苦参注射液对Hut-78（人源皮肤T细胞淋巴瘤细胞）抑制效果最强,Loucy（人源T淋巴细胞白血病细胞株）的抑制效果次之,均呈现显着的剂量及时间依赖性。细胞计数法结果与Prestoblue检测结果趋势一致,也进一步验证Prestoblue细胞增殖-活力检测方法检测结果的真实性及准确性。细胞周期检测结果显示CKI处理后Hut-78、Loucy细胞的细胞周期G0-G1,S,G2/M期并未见明显的周期停滞作用。但是subG 1期的比例呈明显剂量依赖性增加,提示细胞凋亡在CKI的作用机制中或许扮演着重要作用。细胞凋亡检测结果显示CKI可以诱导Hut-78、Loucy细胞的凋亡,凋亡相关内切酶casepase3、casepase7蛋白表达的Western Blot检测也进一步证实了这一点。不同的是,CKI在48h更多的引起Hut-78细胞的早期凋亡,其凋亡率增高明显;但在Loucy细胞中,晚期凋亡和坏死细胞比率更多,这说明CKI诱导Loucy细胞死亡的方式或机制与Hut-78可能纯在差异。2.通过分析反向蛋白阵列术（RPPA）结果发现CKI的潜在作用通路可以聚焦在 PI3K/Akt/mTOR、NF-KB、MEK/ERK 等通路,其中 PI3K/Akt/mTOR 通路的多数蛋白表达调节符合CKI调节分子机制的构想。Western Blot验证结果证实CKI可通过下调Hut-78细胞中PI3K/Akt/mTOR通路蛋白表达,进一步调控其下游AMPK/TSC1/mTor/S6通路,从而影响细胞增殖或诱导凋亡。这种现象在Loucy细胞中同样可见。可见,调控PI3K/Akt/mTOR通路及AMPK/TSC1/mTor/S6通路也许是CKI作用T细胞淋巴瘤的主要分子机制。3.高压液相和质谱联用的方法检测提示CKI具有潜在调控谷氨酸及乳酸代谢的作用。CKI可以通过直接减少谷氨酸或乳酸代谢的途径抑制糖解途径酵,减少肿瘤能量代谢。Western Blot蛋白表达验证结果证实CKI具有潜在下调GLS1、LDHA蛋白表达的作用,从而干预肿瘤能量代谢途径,减少肿瘤能量供应。4.通过对C57BL/6J小鼠构建EL4淋巴瘤动物模型,我们发现CKI、MTX干预相比生理盐水组可显着提高生存率,延长生存期,相较于化疗药物MTX,CKI表现出非劣势的作用。比较两个实验的小鼠瘤体生长曲线,发现CKI干预后瘤组织的瘤体积增长速度呈降低趋势,与生存期研究结果相一致,相较于化疗药物MTX,CKI依然表现出非劣势的肿瘤抑制作用。免疫细胞亚群结果提示CKI可以选择性上调T细胞亚群（CD3+）,而其中发挥作用的主要免疫细胞群体可能是上调辅助T细胞（CD3+CD4+）、调节性T细胞（CD4+FoxP3）,或下调Th17细胞（CD3+CD4+IL17）比例达成的。这一发现提示CKI的抗肿瘤作用可能与免疫调控有关。通过对肿瘤组织代谢产物的高压液相和质谱联用的方法发现CKI在谷氨酸途径代谢中,可以显着降低谷氨酰胺、谷氨酸及乳酸含量。这与Hut-78及Loucy的实验结果相一致,也进一步提示CKI可以通过抑制谷氨酸及糖酵解途径影响肿瘤能量代谢,降低肿瘤供能,从而发挥抑制肿瘤生长的作用。小鼠肿瘤组织石蜡切片的制作及Cleave Casepase3 IHC染色的结果显示CKI的抑瘤作用可能是通过诱导细胞凋亡产生的,这也进一步印证了体外实验的结论。研究结论:1.复方苦参注射液对淋巴瘤细胞均显示出生长抑制作用。其中对T细胞淋巴瘤要显着强于B细胞淋巴瘤。其发挥细胞增殖抑制的作用可能是通过诱导细胞凋亡完成;2.调控PI3K/Akt/mTOR通路及AMPK/TSC1/mTor/S6通路也许是CKI作用T细胞淋巴瘤的主要分子机制;3.CKI具有降低谷氨酸及乳酸代谢的作用,从而抑制糖解酵途径,减少肿瘤能量代谢,这一点在体内外实验中均得到了验证;4.CKI干预EL4淋巴瘤动物模型可以提高生存率,延长生存期,降低肿瘤生长速度,相较于化疗药物MTX,CKI表现出非劣势的作用;5.CKI发挥肿瘤免疫调节的机制可能是下调Th17（CD3+CD4+IL17）/Treg（CD4+FoxP3）比例,提示CKI的抗肿瘤作用可能是通过抑制肿瘤相关性炎症发挥的。
尚海霞[7]（2020）在《八宝丹通过调控mTOR通路抑制胃癌细胞增殖及诱导其凋亡和自噬的机制研究》文中指出目的:通过体内外实验探讨八宝丹（Babao Dan;BBD）对胃癌生长的影响,从细胞增殖、细胞凋亡和细胞自噬三方面探究BBD抗胃癌的作用机制,为传统中药BBD抗胃癌临床治疗提供理论依据。方法:1.体外实验:（1）体外培养胃癌细胞（AGS和MGC80-3）,经不同浓度的BBD（0、0.25、0.5、1 mg/mL）干预细胞24 h后,显微镜下观察细胞形态的改变;台盼蓝计数分析细胞数的改变;采用LDH法检测细胞毒性作用;集落形成实验、周期实验分别检测细胞集落形成能力和细胞周期的影响;Western blot检测PCNA、Survivin、Cyclin D1、CDK4、p21增殖蛋白表达;（2）Hoechst 33258染色、Annexin V-APC染色检测细胞凋亡;JC-1染色测定线粒体膜电位的变化;Western blot检测Bax、Bcl-2、Fas、FasL凋亡相关蛋白表达水平;比色法分析caspase-3/-8/-9的活化情况;（3）Western blot检测LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ转换及p62、Beclin-1自噬蛋白水平;（4）Bio-plex检测MAPK（p-JNK1/2/3、p-p38、p-ERK1/2）活化情况和Western blot检测PI3K、p-AKT、p-mTOR、p-AMPKα蛋白的表达。2.体内实验:建立MGC80-3皮下移植瘤模型,按照瘤体体积随机分成两组:对照组（Control组）和BBD组（0.25 g/kg）;一个月后取材。（1）取材当天对剥离的瘤体进行称重并拍照分析BBD对瘤重和对移植瘤大小的影响;（2）TUNEL检测瘤组织细胞凋亡情况;（3）IHC检测Ki-67蛋白表达和Western blot检测PCNA、Survivin、Cyclin D1、CDK4、p21、Bax、Bcl-2、cleaved-caspase-3、LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ转换、p62、Beclin-1蛋白表达;（4）Bio-plex和Western blot检测瘤组织中p-JNK1/2/3、p-p38、p-ERK1/2、PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR、AMPKα、p-AMPKα蛋白表达情况。结果:1.体外实验:（1）BBD抑制细胞数量及生长密度;LDH实验显示BBD显着增加细胞毒性（P<0.01）;集落形成实验和周期实验表明BBD抑制细胞增殖（P<0.05）;Western blot实验表明BBD上调p21而下调PCNA、Survivin、Cyclin D1、CDK4蛋白表达抑制细胞增殖（P<0.05）;（2）Hoechst 33258和Annexin V-APC染色表明BBD促进细胞凋亡（P<0.01）;JC-1染色也表明BBD导致MMPs逐渐下降（P<0.01）;Western blot实验显示BBD上调Bax、Fas、FasL而下调Bcl-2凋亡蛋白表达（P<0.05）;比色法结果表明BBD可促进caspase-3/-8/-9活化（P<0.05）;（3）Western blot结果显示BBD增加LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ转换及Beclin-1的表达而下调p62的表达（P<0.05）;（4）Bio-plex结果显示BBD抑制细胞中MAPK（p-JNK1/2/3、p-p38、p-ERK1/）活化（P<0.05）;Western blot结果显示细胞中PI3K蛋白表达水平降低,p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值降低,p-AMPKα/AMPKα比值升高（P<0.05）。2.体内实验:（1）BBD减少胃癌细胞移植瘤小鼠体内的瘤重（P<0.05）,但对治疗前后的小鼠体重无明显影响（P>0.05）;（2）TUNEL结果显示BBD诱导瘤组织细胞凋亡（P<0.01）;（3）IHC检测结果显示BBD降低瘤组织中Ki-67蛋白表达（P<0.01）;Western blot结果显示BBD促进瘤组织中Bax、cleaved-caspae-3、p21、LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ转换、Beclin-1蛋白表达,降低Bcl-2、PCNA、Survivin、Cyclin D1、CDK4、p62蛋白表达（P<0.05）;（4）Bio-plex和Western blot实验表明了BBD抑制瘤组织中p-JNK1/2/3、p-p38、p-ERK1/蛋白表达;Western blot结果显示BBD降低瘤组织中PI3K蛋白表达、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR的比值,并增加p-AMPKα/AMPKα的比值（P<0.05）。结论:BBD在体内外对胃癌均具有显着的抑制作用,能够抑制胃癌细胞增殖,诱导胃癌细胞凋亡及自噬。BBD通过抑制MAPK（p-JNK1/2/3、p-ERK1/2、p-p38）和PI3K/AKT的活化及促进AMPK的活化进而抑制mTOR信号通路的活化发挥对胃癌的抑制作用。
李亚[8]（2020）在《新加良附方调控miR-34a/SIRT1/p53及Caspase凋亡通路抑制胃癌的机制研究》文中指出我国是胃癌大国,中西医结合治疗是我国胃癌综合治疗的独特模式。临床实践证实采用新加良附方（高良姜、香附、穿山龙）联合化疗针对进展期胃癌较单纯化疗具有更高的临床缓解率和更优的生活质量。机制研究发现新加良附方抗胃癌作用与调控凋亡相关基因表达有关,但其上游调控机制尚未明确。基于前期基础,本研究拟从microRNA角度,深入探讨新加良附方及穿山龙主要成分薯蓣皂苷元对miR-34a/SIRT1/p53通路及miR-34a凋亡相关靶基因的调控作用和对凋亡信号通路的激活作用,明确新加良附方及薯蓣皂苷元的作用机制,为新加良附方治疗胃癌提供基础研究依据。目的通过体内外实验明确新加良附方及成分薯蓣皂苷元对人胃癌细胞功能的抑制作用,基于miR-34a/SIRT1/p53及Caspase凋亡通路,明确新加良附方及薯蓣皂苷元抗胃癌作用机制。方法1.新加良附方及薯蓣皂苷元抑制胃癌细胞功能作用及机制研究①新加良附方及薯蓣皂苷元抑制人胃癌细胞功能实验:CCK-8实验检测新加良附方及薯蓣皂苷元抑制胃癌细胞增殖的作用,流式细胞术检测新加良附方及薯蓣皂苷元对胃癌细胞周期及凋亡的调控作用,划痕实验检测新加良附方抑制胃癌细胞迁移作用;②新加良附方、薯蓣皂苷元调控miR-34a作用:qPCR检测正常胃黏膜上皮细胞及胃癌细胞miR-34a表达,慢病毒感染构建过表达mi R-34a的胃癌HGC-27细胞,CCK-8方法检测过表达miR-34a胃癌HGC-27细胞增殖功能,划痕实验检测过表达mi R-34a胃癌细胞迁移能力,并通过qPCR方法检测新加良附方、薯蓣皂苷元对miR-34a基因水平影响;③新加良附方、薯蓣皂苷元调控miR-34a抗胃癌作用机制研究:qPCR方法检测过表达miR-34a后HGC-27细胞miR-34a/SIRTl/p53通路及miR-34a靶基因表达水平,qPCR方法检测新加良附方、薯蓣皂苷元对miR-34a/SIRT1/p53通路、miR-34a靶基因及Caspase凋亡通路的作用,Western blot检测新加良附方、薯蓣皂苷元对Caspase凋亡通路作用。2.新加良附方及薯蓣皂苷元对裸鼠胃癌移植瘤抑制作用及机制研究BSP方法检测胃癌细胞miR-34a甲基化水平,并构建HGC-27胃癌细胞荷瘤小鼠模型,设正常对照组、模型组、新加良附方中剂量组、新加良附方高剂量组、薯蓣皂苷元组、5-Aza-CdR组、中剂量联合组及高剂量联合组,药物干预18天,观察裸鼠一般状态;测量移植瘤长短径,计算瘤体积和抑瘤率,观察裸鼠生存期;qPCR方法检测miR-34a表达情况;Western blot方法检测miR-34a/SIRT1/p53相关蛋白表达及Caspase凋亡通路情况。结果1.新加良附方及薯蓣皂苷元抑制胃癌细胞功能作用及机制研究新加良附方抑制人胃癌细胞功能实验:新加良附方呈浓度及时间依赖性地抑制HGC-27、MGC80-3及AGS细胞增殖;新加良附方提高G1期HGC-27细胞,降低G2期细胞;新加良附方可诱导HGC-27及MGC80-3细胞凋亡,其中诱导HGC-27细胞凋亡作用显着;与对照组比较,新加良附方组除24h 4mg/mL浓度外,其余各组均可抑制胃癌HGC-27细胞迁移功能,作用呈时间及浓度依赖性;新加良附方可显着抑制MGC80-3细胞迁移功能,作用呈时间依赖性,差异有统计学意义;各浓度新加良附方24h及48h均可抑制AGS细胞迁移;薯蓣皂苷元抑制人胃癌细胞功能实验:薯蓣皂苷元呈时间及浓度依赖性地抑制胃癌HGC-27、MGC80-3及AGS细胞增殖作用,差异有统计学意义;薯蓣皂苷元干预后胃癌细胞周期无明显改变;薯蓣皂苷元可诱导HGC-27及MGC80-3细胞凋亡,其中诱导HGC-27细胞凋亡作用显着;新加良附方及薯蓣皂苷元调控miR-34a作用:HGC-27、MGC80-3及AGS细胞中miR-34a相对表达量显着低于正常细胞GES-1,p<0.05;与阴性对照组相比较,过表达miR-34a后,HGC-27细胞增殖能力受到显着抑制,并可显着抑制其迁移能力;新加良附方及薯蓣皂苷元干预后,HGC-27及AGS细胞miR-34a表达水平升高,p<0.01;新加良附方及薯蓣皂苷元调控miR-34a抗胃癌作用机制研究:过表达miR-34a显着上调p53并下调SIRT1表达水平,可提高Bax及Caspase-3 mRNA表达水平,降低Bcl-2及Survivin的mRNA表达水平;新加良附方及薯蓣皂苷元干预可提高p53表达,降低SIRT1表达水平,并可上调Bax及Caspase-3的mRNA表达水平,降低Bcl-2及Survivin的mRNA表达水平,p<0.01,差异有统计学意义;Z-VAD-FMK可降低新加良附方及薯蓣皂苷元诱导的HGC-27细胞凋亡;新加良附方作用后可降低Caspase-9、Caspase-3前体水平,升高活化Caspase-3的表达水平;2.新加良附方及薯蓣皂苷元对裸鼠胃癌移植瘤抑制作用及机制研究胃癌细胞HGC-27在miR-34a各位点甲基化水平均较高,选取HGC-27细胞构建胃癌荷瘤小鼠模型,药物干预后观察到新加良附方中剂量组、新加良附方高剂量组、薯蓣皂苷元组及中剂量联合组、高剂量联合组裸鼠状态较好,反应灵敏,活动及饮食、饮水量正常,5-Aza-CdR组裸鼠一般状态较差。5-Aza-CdR组裸鼠体重于实验给药第8天后逐渐下降,第11天其体重低于新加良附方高剂量组,差异有统计学意义,第15天,其体重低于模型组、新加良附方高剂量组、薯蓣皂苷元组及高剂量联合组,p<0.05,第18天,其体重低于其余各组,p<0.05,差异有统计学意义。5-Aza-CdR组抑瘤率为32.08%,与模型组比较,p>0.05,差异无统计学意义,中剂量联合组抑瘤率为35.00%,高剂量联合组抑瘤率为37.18%,与模型组相比较,p<0.05,差异有统计学意义。模型组平均生存时间为46.33±10.50天,新加良附方中剂量组、新加良附方高剂量组、薯蓣皂苷元组、中剂量联合组及高剂量联合组裸鼠均未出现死亡现象,平均生存时间为57.00±0.00天,具有延长荷瘤裸鼠生存时间的趋势,5-Aza-CdR组裸鼠平均生存时间为40.33±7.37天,生存时间较模型组短。除新加良附方中剂量组外,其余各治疗组均可提高胃癌miR-34a表达,以联合组作用最为显着;新加良附方中剂量、高剂量、薯蓣皂苷元及高剂量联合组均可显着增加p53蛋白的表达,且药物干预各组均可显着抑制SIRT1 蛋白的表达,可降低 Bcl-2、Survivin 表达,并提高 Bax、Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9 及 Caspase-3 底物 Cleaved PARP 蛋白的表达。结论1.miR-34a表达水平异常与胃癌发生密切相关;2.新加良附方可抑制胃癌细胞增殖及迁移、调节细胞周期、诱导凋亡,其成分薯蓣皂苷元可抑制胃癌细胞增殖,并诱导胃癌细胞凋亡,机制可能与调控miR-34a/SIRT1/p53通路、miR-34a凋亡相关靶基因及激活Caspase凋亡通路相关;3.新加良附方联合5-Aza-CdR可抑制胃癌裸鼠移植瘤生长,并可改善裸鼠一般状态,有维持体重、延长其生存时间的趋势,机制可能与调控miR-34a/SIRT1/p53通路、miR-34a凋亡相关靶蛋白及Caspase凋亡信号通路相关。
黄佳钦[9]（2020）在《理气活血解毒法治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变的疗效与机制研究》文中研究表明目的慢性萎缩性胃炎（chronic atrophic gastritis,CAG）是临床常见的消化系统疾病,而在慢性萎缩性胃炎基础上伴发的肠上皮化生或（和）异型增生称为胃癌癌前病变（precancerous lesions of gastric cancer,PLGC）。由于胃癌具有发病率高、生存率低、发现晚等特点,故胃癌癌前病变作为肠型胃癌发展过程中的重要中间环节,早期在此阶段进行及时、有效的干预对阻断胃癌的发生、发展具有至关重要的意义。西医对于此病的治疗主要集中在对症治疗及对因治疗,其中包括根除幽门螺杆菌、抗胆汁反流、抗氧化、叶酸及COX-2抑制剂等治疗方式,尚缺乏特异性干预措施。而中医药在整体观及辨证论治理论指导下展现出光明的前景,国内外研究发现,中医药在延缓、阻断甚至逆转PLGC方面发挥了独特的作用,且逐渐成为了研究的热点。本课题组结合PLGC病机特点及长期的临床经验,总结出使用理气活血解毒法干预PLGC,并在前期的临床研究中得出该法在PLGC的治疗上确有疗效,然其具体的分子机制仍不明确。故本课题拟从临床疗效和分子机制两部分展开研究:临床疗效部分,通过证候量表、胃镜及病理组织学等评价方式以明确理气活血解毒法治疗PLGC的临床疗效;分子机制部分,采用网络药理学技术及多色免疫荧光技术探讨理气活血解毒法干预慢性萎缩性胃炎癌前病变的作用机制。方法本研究由文献综述、临床疗效研究及分子机制研究三部分组成。文献综述部分分为以下2部分:“慢性萎缩性胃炎癌前病变中医研究进展”部分,对本病的病名、病因、病机特点、分型论治、现代医家治疗特点等方面展开论述;“慢性萎缩性胃炎癌前病变西医研究进展”部分,主要围绕本病的流行病学、病因、治疗方法及发病机制等方面进行探讨。临床疗效研究部分,收集就诊于东直门医院门诊的肝胃郁热、气虚血瘀型慢性萎缩性胃炎癌前病变患者30例,使用理气活血解毒法方药对其进行干预,对比患者治疗前后临床症状和胃镜病理学表现情况,试图探索理气活血解毒法治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变的临床疗效。分子机制部分,首先采用网络药理学技术初步探索理气活血解毒法方药干预慢性萎缩性胃炎癌前病变的作用机制,进而运用理气活血解毒法干预30例肝胃郁热、气虚血瘀型慢性萎缩性胃炎癌前病变患者,运用多色免疫荧光技术检测患者治疗前后胃组织PI3K/AKT通路关键分子PI3K、AKT、Bcl-2、P53、ERBB4、PTEN的水平,尝试探讨理气活血解毒法治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变的分子机制。结果（1）一般情况对比,本研究共纳入30例研究对象,其中年龄最大者68岁,最小者35岁,平均年龄为53.93±7.87,其中男性19例,女性11例,且不同性别年龄分布无统计学差异（P>0.05）;教育程度在大学以下者较多,其中高中21例,占70.00%;就诊季节以冬季（46.67%）、秋季（40.00%）居多;本病诱发情绪因素以焦虑忧虑（63.33%）、急躁易怒（60.00%）、精神紧张（43.33%）多见;患者饮食习惯以嗜食油腻（70.00%）、甜食（60.00%）、辛辣（40.00%）居多;生活作息方面,作息规律（46.67%）者多于熬夜（40.00%）与劳倦（30.00%）的患者;烟酒史方面,吸烟（43.33%）及饮酒（36.67%）患者较多。（2）临床疗效主要从临床症状积分及病理组织学积分两方面评估运用尼莫地平法计算临床症状积分得出,痊愈2例（6.67%）,显效5例（16.67%）,有效19例（63.33%）,无效4例（13.33%）,总有效率86.67%,且治疗前后患者症状总积分、主要症状积分及次要症状积分差异均具有显着统计学意义（P<0.01）。此外,对各症状治疗前后积分进行统计,得出胃脘痞塞、心烦易怒、反酸、烧心、口苦、口干、暖气、身重倦怠、精神疲乏、纳差、气短、大便溏薄症状治疗前后积分差异具有显着统计学意义（P<0.01）,胃脘疼痛、懒言症状治疗前后积分差异具有统计学意义（P<0.05）,胃中嘈杂、大便干结症状治疗前后积分差异无统计学意义（P>0.05）。对患者治疗前后病理组织学积分进行统计发现,治疗前后患者病理总积分差异具有显着统计学意义（P<0.01）,且萎缩、肠化、异型增生及慢性炎症4项病理表现治疗前后积分差异具有统计学意义（P<0.05）,而活动性病理表现治疗前后积分差异无统计学意义（P>0.05）。（3）分子机制研究结果包括网络药理学结果与PI3K/AKT通路关键分子多色免疫荧光检测结果网络药理学结果共搜集了 858个化合物,以OB≥30%,DL≥0.18为筛选条件,共得到83个口服利用度和类药性较好的候选化合物;化合物-靶点网路共有41个hub节点,其中靶点≥35个的化合物有11个,13个靶点能与≥20个化合物发生相互作用;靶点-疾病网络有54个节点,其中包含31个靶点与23个疾病;对参白颗粒中6种草药对应的靶点进行GO富集分析,确定了 324个GO条目;并对上调的部分差异基因进行KEGG通路富集分析,根据FDR≤0.01筛选得到24条KEGG通路信息。对30例患者治疗前后的胃组织PI3K/AKT通路关键分子进行多色免疫荧光检测得出,PI3K治疗前后光密度差异具有显着统计学意义（P<0.01）,AKT、Bcl-2治疗前后光密度差异具有统计学意义（P<0.05）,ERBB4、P53、PTEN治疗前后光密度差异无统计学意义（P>0.05）。结论（1）一般情况中,从性别年龄分析,该病好发于45-65岁的中老年,男性发病率较高。且患者发病与季节、饮食、情绪有关,其中就诊季节以冬、秋季节较多,情绪中焦虑忧虑、急躁易怒、精神紧张三方面因素影响较大,饮食以嗜食油腻、甜食、辛辣、生冷食物者居多,同时烟酒史也是本病发病的重要影响因素之一。（2）采用自身前后对照临床试验发现,患者治疗前后临床症状及病理组织学表现均得到了明显改善,故可以发现理气活血解毒法方药对慢性萎缩性胃炎癌前病变具有明确的临床疗效。（3）网络药理学结果发现细胞凋亡、P53、ERBB4、癌症通路等17条通路均与PI3K/AKT通路相关,由此猜测,参白颗粒干预慢性萎缩性胃炎癌前病变可能通过PI3K/AKT通路实现。进一步观察理气活血解毒法对慢性萎缩性胃炎癌前病变PI3K/AKT通路关键分子PI3K、AKT、Bcl-2、ERBB4、P53、PTEN分子的干预作用,发现理气活血解毒法可下调PI3K、AKT、Bcl-2分子的表达水平,故该法治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变可能通过诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖发挥作用,从而影响癌变的发展。
朱静[10]（2020）在《养阴化瘀解毒方对常氧和低氧条件下结肠癌细胞增殖与凋亡的影响》文中提出目的恶性增殖和逃避细胞死亡是肿瘤形成的标志。本课题基于结肠癌在中医学中的阴虚、热毒、血瘀等病因病机特点,探讨养阴化瘀解毒方（Yangyin Huayu Jiedu Decoction,YYHYJDD）含药血清对常低氧环境下的结肠癌细胞增殖与凋亡影响的作用机制,为结肠癌的治疗和科研实践提供思路。方法1.常氧条件下养阴化瘀解毒方含药血清对结肠癌细胞增殖、凋亡的影响:（1）采用MTS比色法,检测YYHYJDD含药血清在常氧条件下对结肠癌HCT116细胞增殖的影响;（2）AOEB染色法观察含药血清对HCT116细胞形态学变化的影响;（3）Annexin V-FITC/PI双染后流式细胞术法检测含药血清对结肠癌HCT116细胞凋亡的影响;（4）蛋白质免疫印迹法（Western Blot）检测结肠癌HCT116细胞凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白（Bax）、半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）前体蛋白的表达情况。2.不同氧浓度对结肠癌HCT116细胞增殖的影响:（1）建立（1%O2、5%O2、20%O2）氧浓度模型,MTS法检测不同氧浓度对结肠癌HCT116细胞增殖的影响,筛选出结肠癌细胞增殖最强的和最慢的氧气浓度;（2）将筛选的氧浓度进行Annexin V-FITC/PI双染法检测HCT116细胞增殖周期、凋亡情况;（3）荧光定量PCR检测结肠癌HCT116细胞在不同氧浓度下HIF-1αm RNA基因的表达情况;（4）蛋白检测结肠癌HCT116细胞在两种氧浓度下HIF-1α蛋白表达情况。3.低氧条件下YYHYJDD含药血清对结肠癌HCT116细胞增殖与凋亡的影响:（1）采用MTS比色法,检测YYHYJDD含药血清在低氧条件下对结肠癌细胞增殖的影响;（2）AOEB染色观察含药血清对结肠癌HCT116细胞凋亡形态学变化;（3）Annexin V-FITC/PI双染后流式法细胞术后检测含药血清对HCT116细胞凋亡情况;（4）Western Blot检测低氧诱导因子1α（HIF-1α）及下游Bcl-2、Bax、Caspase-3前体相关靶蛋白的表达情况。结果1.常氧条件下养阴化瘀解毒方含药血清对结肠癌细胞增殖与凋亡检测结果:（1）与空白血清对照组相比,养阴化瘀解毒方含药血清低中高剂量组细胞的活性抑制从48 h开始出现明显趋势,抑制率在72 h最强（P<0.05,P<0.01）;（2）干预48h AOEB染色HCT116细胞呈现不同时期的凋亡形态;（3）流式细胞术显示低中高剂量含药血清组干预HCT116细胞晚期凋亡明显,总凋亡率与空白对照组相比差异显着（P<0.01）;（4）Western Blot结果YYHYJDD含药血清在高剂量浓度组下调Bcl-2、Caspase-3前体蛋白表达,中高剂量浓度组Bax的表达上调,Bcl-2/Bax比值下调（P<0.05,P<0.01）。2.1%O2、5%O2、20%O2的三种不同的氧气条件检测结果:（1）HCT116细胞24 h至96 h结肠癌细胞出现增长趋势,与1%O2和20%O2条件相比,5%O2下HCT116细胞增殖速度最快（P<0.05,P<0.01）,与1%O2和5%O2相比,20%O2条件下HCT116细胞增殖速度相对较慢（P<0.05,P<0.01）;（2）流式周期和凋亡实验:5%O2的结肠癌细胞在S期和G2/M期比值大于20%O2条件下的结肠癌细胞（P<0.05,P<0.01）;（3）Western Blot结果,与20%O2相比,5%O2条件下HIF-1α蛋白水平上调（P<0.01）。3.低氧条件下养阴化瘀解毒方含药血清对结肠癌细胞增殖、凋亡检测结果:（1）与低氧空白对照组相比,YYHYJDD含药血清干预HCT116细胞在48 h、72 h抑制率最显着（P<0.05,P<0.01）;（2）AOEB染色含药血清干预结肠癌细胞凋亡随含药血清的浓度增加而增大（P<0.05,P<0.01）;（3）流式结果YYHYJDD含药血清能促进HCT116细胞发生凋亡（P<0.05,P<0.01）;（4）Western Blot结果该方含药血清在低中高三个剂量浓度组能上调Bax的表达（P<0.01）,可以在中剂量浓度组下调Bcl-2的表达（P<0.05）,高剂量浓度组有下调Caspase-3前体蛋白的趋势,在中高剂量浓度组能够下调HIF-1α表达（P<0.05）。结论1.常氧条件下养阴化瘀解毒方含药血清能够抑制结肠癌HCT116细胞增殖活性,可能通过下调Bcl-2/Bax比值、Caspase-3前体蛋白的表达,发挥促凋亡的作用。2.5%O2氧浓度结肠癌细胞增殖速度最快、可能的机制是使结肠癌细胞的增殖停留在S、G2/M期,并在分子水平上调HIF-1α蛋白的表达。3.养阴化瘀解毒方含药血清也可在低氧条件下有一定的时效性、抑制结肠癌HCT116细胞增殖,并使细胞凋亡形态和凋亡率发生改变,发挥促凋亡的作用,可能与下调HIF-1a的表达及其下游相关的的信号分子Bcl-2/Bax的比值、Caspase-3前体蛋白的表达有关。
二、复方仙酥胶囊对人胃癌细胞凋亡及细胞周期的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、复方仙酥胶囊对人胃癌细胞凋亡及细胞周期的影响（论文提纲范文）
（1）益气消症颗粒联合化疗治疗气虚血瘀痰凝型晚期胃癌的临床研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 中英文缩写对照表 |
| 前言 |
| 临床研究 |
| 1.病例收集 |
| 2.诊断标准 |
| 2.1 胃癌的西医诊断标准及分期标准 |
| 2.2 胃癌的中医诊断标准 |
| 2.3 病例纳入标准 |
| 2.4 病例排除标准 |
| 2.5 病例中止、剔除、脱落标准 |
| 3.研究方法 |
| 3.1 病例分组 |
| 3.2 治疗方法 |
| 3.3 观察指标 |
| 3.4 疗效评价标准 |
| 3.5 安全性评价 |
| 3.6 统计学处理 |
| 4. 研究结果 |
| 4.1 基线资料 |
| 4.2 治疗结果 |
| 4.3 安全性评价 |
| 5. 讨论 |
| 5.1 疗效分析 |
| 5.2 晚期胃癌的治疗现状 |
| 5.3 方药分析 |
| 5.4 临证体会 |
| 6.问题与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 中西医结合治疗胃癌的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附表 |
| 致谢 |
| 简介 |
（2）含斑蝥制剂联合化疗治疗胃癌疗效及安全性的Meta分析与考证研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 胃癌的西医研究进展 |
| 1 概述 |
| 2 筛查及治疗进展 |
| 3 小结 |
| 综述二 胃癌的中医研究进展 |
| 1 概述 |
| 2 病因病机 |
| 3 辨证论治 |
| 综述三 虫类药治疗肿瘤的研究进展 |
| 1 概述 |
| 2 虫类药在肿瘤治疗中的作用 |
| 3 虫类药物应用举隅 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 含斑蝥制剂联合化疗治疗胃癌疗效及安全性的Meta分析 |
| 1 资料与方法 |
| 1.1 文献纳入标准 |
| 1.2 文献排除标准 |
| 1.3 数据来源及检索策略 |
| 1.4 数据筛选、提取及质量评价 |
| 1.5 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 检索及筛选结果 |
| 2.2 纳入研究的基本特征 |
| 2.3 纳入研究的质量评价 |
| 2.4 Meta分析结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 文献质量评价 |
| 3.2 疗效分析 |
| 3.3 病机探讨 |
| 3.4 治则探讨 |
| 3.5 中药探讨 |
| 3.6 安全性分析 |
| 4 小结 |
| 第三部分 中药斑蝥的考证研究 |
| 1 资料与方法 |
| 2 研究结果 |
| 2.1 药性考证 |
| 2.2 功效主治考证 |
| 2.3 炮制及用药禁忌考证 |
| 2.4 常用配伍及附方考证 |
| 3 讨论 |
| 3.1 药性 |
| 3.2 功效主治演变 |
| 3.3 炮制及用药禁忌 |
| 3.4 常用配伍及附方 |
| 4 小结 |
| 结语 |
| 1 结论 |
| 2 创新性 |
| 3 问题及局限性 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 在学期间主要研究成果 |
（3）运化毒邪方及其有效成分控制胃癌的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 第1章 从毒邪治疗胃癌理论架构 |
| 1.1 毒邪理论治疗肿瘤源流及辨治要法 |
| 1.1.1 毒邪理论治疗肿瘤源流 |
| 1.1.2 毒邪理论辨治肿瘤要法 |
| 1.1.2.1 扶正祛毒 |
| 1.1.2.2 清热解毒 |
| 1.1.2.3 理气排毒 |
| 1.1.2.4 祛瘀化毒 |
| 1.1.2.5 化痰散毒 |
| 1.1.2.6 祛风摄毒 |
| 1.1.2.7 泄浊解毒 |
| 1.1.2.8 安邪休毒 |
| 1.1.2.9 灭虫化毒 |
| 1.1.2.10 以毒攻毒 |
| 1.1.3 小结 |
| 参考文献 |
| 1.2 从“脾主运化”理论探讨胃癌论治 |
| 1.2.1 “脾主运化”藏象理论的渊源 |
| 1.2.2 胃癌重要病机——脾失运化,正虚毒犯 |
| 1.2.3 从“脾主运化”论治胃癌方略 |
| 1.2.3.1 固本祛毒 |
| 1.2.3.2 运化食毒 |
| 1.2.3.3 运化痰毒 |
| 1.2.3.4 运气化毒 |
| 1.2.3.5 其他 |
| 1.2.4 小结 |
| 参考文献 |
| 第2章 运化毒邪方对进展期胃癌复发转移干预的临床研究 |
| 2.1 资料与方法 |
| 2.1.1 一般资料 |
| 2.1.2 中医肿瘤样本库构建 |
| 2.1.3 研究方法及分组 |
| 2.1.4 临床疗效评定标准 |
| 2.1.5 观察指标 |
| 2.1.6 不良反应观察 |
| 2.1.7 随访方式 |
| 2.1.8 试验监管 |
| 2.1.9 统计学方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 数据库构建情况 |
| 2.2.2 病例资料分析描述 |
| 2.2.3 两组临床疗效比较 |
| 2.2.4 两组KPS、ECOG评分和血清肿瘤标记物比较 |
| 2.2.5 两组不良反应比较 |
| 2.2.6 两组一年生存率比较 |
| 2.2.7 单因素分析 |
| 2.2.8 多因素COX比例风险模型分析 |
| 2.2.9 两组无疾病进展生存期比较 |
| 2.2.10 两组血清代谢组学比较 |
| 2.3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第3章 运化毒邪方对胃癌生长及介导CLAUDIN-4调控上皮间质转化信号通路的作用 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 药物 |
| 3.1.2 细胞株 |
| 3.1.3 主要试剂 |
| 3.1.4 临床标本 |
| 3.1.5 实验动物 |
| 3.1.6 仪器 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 人胃癌细胞培养 |
| 3.2.2 MTT比色法检测对人胃癌细胞增殖能力的影响 |
| 3.2.3 划痕实验检测细胞迁移 |
| 3.2.4 建立PDTX模型 |
| 3.2.5 动物分组及给药 |
| 3.2.6 肿瘤体积及质量测定 |
| 3.2.7 Western blot检测GSK3β,VEGF-C,Claudin-4蛋白表达 |
| 3.2.8 qPCR检测GSK3β,VEGF-C,Claudin-4 mRNA的表达 |
| 3.2.9 统计学处理 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 对AGS、BGC-803、SGC-7901细胞增殖的影响 |
| 3.3.2 对AGS、BGC803、SGC7901细胞迁移能力的影响 |
| 3.3.3 PDTX模型成瘤情况 |
| 3.3.4 对移植瘤生长的影响 |
| 3.3.5 对Claudin-4,VEGF-C,GSK3β蛋白表达的影响 |
| 3.3.6 对Claudin-4、VEGF-C、GSK3βmRNA表达的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第4章 基于高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)联用技术的运化毒邪方化学成分研究 |
| 4.1 仪器与材料 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 色谱条件 |
| 4.2.2 质谱条件 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 运化毒邪方化学活性成分检测 |
| 4.3.2 运化毒邪方化学活性成分之一人参皂苷Rg3质谱图信息 |
| 4.4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第5章 运化毒邪方主要活性成分之一人参皂苷RG3对胃癌生长及CLAUDIN-4/VEGF-C/GSK3B通路调控作用 |
| 5.1 材料 |
| 5.1.1 药物 |
| 5.1.2 细胞株 |
| 5.1.3 主要试剂 |
| 5.1.4 临床标本 |
| 5.1.5 实验动物 |
| 5.1.6 仪器 |
| 5.2 方法 |
| 5.2.1 人胃癌细胞培养 |
| 5.2.2 MTT比色法检测对人胃癌细胞增殖能力的影响 |
| 5.2.3 划痕实验检测细胞迁移 |
| 5.2.4 建立PDTX模型 |
| 5.2.5 动物分组及绘药 |
| 5.2.6 肿瘤体积及质量测定 |
| 5.2.7 Western blot检测GSK3β、VEGF-C、Claudin-4蛋白表达 |
| 5.2.8 qPCR检测GSK3β、VEGF-C、Claudin-4 mRNA的表达 |
| 5.2.9 统计学处理 |
| 5.3 结果 |
| 5.3.1 对AGS、BGC-803、SGC-7901细胞增殖的影响 |
| 5.3.2 对BGC803、AGS、SGC7901细胞迁移力的影响 |
| 5.3.3 对移植瘤生长的影响 |
| 5.3.4 对Claudin-4/VEGF-C/GSK3β通路蛋白表达的影响 |
| 5.3.5 对Claudin-4/VEGF-C/GSK3β通路mRNA表达的影响 |
| 5.4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第6章 VEGFR3靶向性纳米人参皂甙RG3对原位胃癌小鼠移植瘤的影响 |
| 6.1 材料 |
| 6.1.1 药物 |
| 6.1.2 细胞株 |
| 6.1.3 主要试剂 |
| 6.1.4 实验动物 |
| 6.1.5 仪器 |
| 6.2 方法 |
| 6.2.1 人胃癌细胞培养 |
| 6.2.2 胃癌裸鼠原位荧光移植模型的建立 |
| 6.2.3 动物给药及动态观察 |
| 6.2.4 免疫组化检测 |
| 6.2.5 RT-PCR检测基因表达 |
| 6.2.6 统计学处理 |
| 6.3 结果 |
| 6.3.1 对移植瘤生长的影响 |
| 6.3.2 对淋巴结转移的影响 |
| 6.3.3 对VEGF-C/VEDF-D/VEGFR-3通路蛋白表达的影响 |
| 6.3.4 对VEGF-C/VEDF-D/VEGFR-3通路mRNA表达的影响 |
| 6.3.5 对体重和毒性观察 |
| 6.4 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 综述 肿瘤毒邪论治研宄现状 |
| 参考文献 |
| 攻读博士期间公开发表的论着及取得的科研成果 |
| 致谢 |
（4）九香虫血淋巴对小鼠乳腺癌移植瘤生长抑制作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 九香虫研究进展 |
| 1.1 九香虫传统临床应用 |
| 1.2 九香虫现代药用研究 |
| 2 中药治疗乳腺癌的研究进展 |
| 2.1 乳腺癌的中医学认识 |
| 2.2 中药治疗乳腺癌的基础实验研究 |
| 2.3 中药治疗乳腺癌的临床研究 |
| 第二章 九香虫血淋巴对小鼠乳腺癌4T1细胞的体外作用效果 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 1.4 实验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 九香虫血淋巴对小鼠乳腺癌4T1细胞形态变化的影响 |
| 2.2 MTT法检测九香虫血淋巴对小鼠乳腺癌4T1细胞体外增殖的影响 |
| 2.3 Hoechst33258染色检测九香虫血淋巴对小鼠乳腺癌4T1细胞凋亡的影响 |
| 2.4 流式细胞术检测九香虫血淋巴对小鼠乳腺癌4T1细胞周期的影响 |
| 3 小结与讨论 |
| 第三章 九香虫血淋巴灌胃用药对小鼠乳腺癌移植瘤的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 1.4 实验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 小鼠乳腺癌移植瘤动物模型的构建 |
| 2.2 九香虫血淋巴灌胃用药对小鼠乳腺癌移植瘤的影响 |
| 2.3 九香虫血淋巴灌胃用药对小鼠血细胞的影响 |
| 2.4 九香虫血淋巴灌胃用药对小鼠体重及肝、脾、肺、肾重量的影响 |
| 2.5 九香虫血淋巴灌胃用药对小鼠瘤体及肝、脾、肺、肾组织结构的影响 |
| 3 小结与讨论 |
| 第四章 九香虫血淋巴腹腔注射用药对小鼠乳腺癌移植瘤的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 1.4 实验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 小鼠乳腺癌移植瘤动物模型的构建 |
| 2.2 腹腔注射九香虫血淋巴对小鼠乳腺癌移植瘤的影响 |
| 2.3 腹腔注射九香虫血淋巴对小鼠血细胞的影响 |
| 2.4 腹腔注射九香虫血淋巴对小鼠体重及肝、脾、肺、肾重量的影响 |
| 2.5 腹腔注射九香虫血淋巴对小鼠瘤体及肝、脾、肺、肾组织结构的影响 |
| 2.6 腹腔注射九香虫血淋巴对小鼠肿瘤细胞凋亡的影响 |
| 3 小结与讨论 |
| 第五章 全文总结及展望 |
| 1 全文总结 |
| 2 论文创新点 |
| 3 论文的不足和展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
（5）四虫片对胃癌细胞生物学行为及瘀毒交阻型胃癌术后患者的影响和网络药理学研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 第一章 文献研究 |
| 第一节 胃癌的中医学研究概述 |
| 第二节 中医药治疗胃癌的实验研究进展 |
| 第三节 四虫片治疗胃癌的药理及优势分析 |
| 第四节 网络药理学在中医药领域的研究进展 |
| 第二章 实验研究 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2.结果 |
| 2.1 四虫片IC50 值的确定 |
| 2.2 四虫片对胃癌细胞增殖的影响 |
| 2.3 四虫片对胃癌细胞凋亡的影响 |
| 2.4 四虫片对胃癌细胞迁移和侵袭的影响 |
| 2.5 四虫片对AKT/Cyclin D1 信号通路的影响 |
| 3.讨论 |
| 4.小结 |
| 第三章 临床研究 |
| 1.临床资料 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 样本量估算 |
| 1.3 研究方案技术路线图 |
| 1.4 诊断标准 |
| 1.5 病例筛选 |
| 2.研究方法 |
| 2.1 分组 |
| 2.2 治疗药物 |
| 2.3 化疗方案 |
| 2.4 治疗方案 |
| 2.5 合并用药及辅助治疗 |
| 2.6 观察指标 |
| 2.7 统计学分析 |
| 3.结果 |
| 3.1 入组完成情况 |
| 3.2 基线资料的比较 |
| 3.3 中医症状评分 |
| 3.4 KPS评分 |
| 3.5 淋巴细胞亚群的比较 |
| 3.6 肿瘤标志物的比较 |
| 3.7 两组治疗前后CTC数量的比较 |
| 3.8 两组不良反应发生情况的比较 |
| 3.9 两组DFS的比较 |
| 4.讨论 |
| 第四章 网络药理学研究 |
| 1.研究目的 |
| 2.材料与方法 |
| 3.结果 |
| 4.讨论 |
| 第五章 结论 |
| 1.论文结论 |
| 2.创新点 |
| 3.不足与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 查新报告 |
| 发表论文 |
（6）复方苦参注射液对恶性T细胞淋巴瘤作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 第一部分 文献综述 |
| 文献综述一: T细胞淋巴瘤的治疗现状及进展 |
| 参考文献 |
| 文献综述二: 复方苦参注射液抗肿瘤作用及其机制实验研究进展 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 复方苦参注射液对恶性T细胞淋巴瘤作用机制研究 |
| 实验一 复方苦参注射液对不同淋巴瘤细胞系增殖的影响及筛选 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 实验二 复方苦参注射液对T细胞淋巴瘤Hut78、Loucy细胞周期的调节作用 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 实验三 复方苦参注射液对T细胞淋巴瘤Hut78、Loucy细胞凋亡的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 结论 |
| 讨论 |
| 第三部分 复方苦参注射液对Hut78、Loucy细胞信号调控通路蛋白表达的影响 |
| 方法 |
| 结果 |
| 结论 |
| 讨论 |
| 第四部分 复方苦参注射液对Hut78、Loucy细胞能量代谢的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 结论 |
| 讨论 |
| 第五部分 复方苦参注射液对EL4淋巴瘤动物模型体内实验研究 |
| 实验一 复方苦参注射液对EL4淋巴瘤模型生存期的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 实验二 复方苦参注射液对EL4淋巴瘤模型免疫调节及肿瘤能量代谢的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 结论 |
| 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简历 |
| 中医药科技查新报告书 |
（7）八宝丹通过调控mTOR通路抑制胃癌细胞增殖及诱导其凋亡和自噬的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表(Abbreviation) |
| 引言 |
| 实验材料和方法 |
| 1 细胞株和动物 |
| 1.1 细胞株 |
| 1.2 动物 |
| 2 药物、试剂、耗材及仪器 |
| 2.1 药物 |
| 2.2 主要试剂及耗材 |
| 2.3 主要仪器 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 实验使用试剂的配制 |
| 3.2 细胞实验 |
| 3.3 动物实验 |
| 4 统计学处理 |
| 实验结果 |
| 1 BBD抑制胃癌AGS和 MGC80-3 细胞增殖 |
| 1.1 BBD对胃癌AGS和 MGC80-3 细胞形态及毒性的影响 |
| 1.2 BBD对胃癌AGS和 MGC80-3 细胞存活能力的影响 |
| 1.3 BBD对胃癌AGS和 MGC80-3 细胞周期的影响 |
| 1.4 BBD对胃癌AGS和 MGC80-3 细胞中PCNA、Survivin、Cyclin D1、CDK4、p21 表达的影响 |
| 2 BBD诱导胃癌AGS和 MGC80-3 细胞凋亡 |
| 2.1 BBD对胃癌AGS和 MGC80-3 细胞凋亡形态学的影响 |
| 2.2 BBD对胃癌AGS和 MGC80-3 细胞凋亡的影响 |
| 2.3 BBD对胃癌AGS和 MGC80-3 细胞线粒体膜电位的影响 |
| 2.4 BBD对胃癌AGS和MGC80-3 细胞凋亡相关蛋白表达和caspase-3/-8/-9 活化的影响 |
| 3 BBD诱导胃癌AGS和 MGC80-3 细胞自噬 |
| 4 BBD调控m TOR信号通路的活化 |
| 5 BBD抑制裸鼠移植瘤的生长 |
| 5.1 BBD对裸鼠生长状态及裸鼠治疗前后体重的影响 |
| 5.2 BBD对裸鼠移植瘤生长的影响 |
| 5.3 BBD对裸鼠移植瘤细胞增殖的影响 |
| 5.4 BBD对裸鼠移植瘤细胞凋亡的影响 |
| 5.5 BBD对裸鼠移植瘤细胞自噬的影响 |
| 5.6 BBD对移植瘤组织中mTOR信号通路活化的影响 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（8）新加良附方调控miR-34a/SIRT1/p53及Caspase凋亡通路抑制胃癌的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 中药抗胃癌基础研究现状与进展 |
| 1 中药有效成分基础研究 |
| 2 单味中药基础研究 |
| 3 复方基础研究 |
| 4 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 综述二 胃癌相关miRNA研究现状与展望 |
| 1 miRNA在胃癌发生发展中的作用研究 |
| 2 miRNA在胃癌诊断治疗中的作用研究 |
| 3 思考与展望 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 实验研究 |
| 实验一 新加良附方及薯蓣皂苷元抑制胃癌细胞功能作用及机制研究 |
| (一) 新加良附方抑制人胃癌细胞功能实验 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| (二) 薯蓣皂苷元抑制人胃癌细胞功能实验 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| (三) 新加良附方及薯蓣皂苷元调控miR-34a作用 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| (四) 新加良附方及薯蓣皂苷元调控miR-34a抗胃癌作用机制研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验二 新加良附方及薯蓣皂苷元对裸鼠胃癌移植瘤抑制作用及机制研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简历 |
（9）理气活血解毒法治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变的疗效与机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 慢性萎缩性胃炎癌前病变中医研究进展 |
| 1 中医病名认识 |
| 2 中医病因病机认识 |
| 3 现代医家辨证论治特点 |
| 4 辨病专方治疗 |
| 5 中成药治疗 |
| 6 外治法 |
| 7 中医药治疗慢性萎缩性胃炎的机制研究 |
| 8 理气活血解毒法 |
| 9 小结 |
| 参考文献 |
| 综述二 慢性萎缩性胃炎癌前病变西医研究进展 |
| 1 病因 |
| 2 治疗 |
| 3 PI3K/AKT通路研究现状 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 临床疗效研究 慢性萎缩性胃炎癌前病变临床疗效研究 |
| 1 临床资料 |
| 2 研究内容与方法 |
| 3 研究结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第三部分 分子机制研究 |
| 一、理气活血解毒法方药治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变的网络药理学研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 二、理气活血解毒法治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变的机制研究 |
| 1 临床资料 |
| 2 研究内容 |
| 3 研究结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 结语 |
| 1 研究结论 |
| 2 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录1 |
| 附录2 |
| 在学期间主要研究成果 |
（10）养阴化瘀解毒方对常氧和低氧条件下结肠癌细胞增殖与凋亡的影响（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 结肠癌的中医病机分析及复方治疗探索 |
| 第一部分 养阴化瘀解毒方对人结肠癌细胞增殖与凋亡的影响 |
| 1 实验材料和仪器 |
| 1.1 细胞株 |
| 1.2 动物 |
| 1.3 伦理审查 |
| 1.4 实验试剂 |
| 1.5 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 培养基的配置 |
| 2.2 细胞培养 |
| 2.3 养阴化瘀解毒方含药血清制备 |
| 2.4 结肠癌细胞分组及给药 |
| 2.5 MTS法检测YYHYJDD含药血清对HCT116 细胞增殖的作用 |
| 2.6 AOEB染色观察YYHYJDD含药血清对HCT116 细胞凋亡形态的影响 |
| 2.7 流式凋亡检测YYHYJDD含药血清对HCT116 细胞凋亡的影响 |
| 2.8 Western Blot检测Bcl-2、Bax、Caspase-3 前体相关蛋白表达情况 |
| 2.9 统计学方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 YYHYJDD含药血清对HCT116 细胞增殖作用的影响 |
| 3.2 YYHYJDD含药血清干预结肠癌HCT116 细胞AOEB凋亡染色结果 |
| 3.3 YYHYJDD含药血清干预HCT116 细胞流式凋亡统计结果 |
| 3.4 YYHYJDD含药血清干预结肠癌HCT116 细胞Bax、Bcl-2和Caspase-3前体相蛋白的表达情况 |
| 4 分析与讨论 |
| 5 小结 |
| 第二部分 模拟肿瘤低氧微环境筛选结肠癌细胞增殖最快的氧浓度 |
| 1 实验材料和仪器 |
| 1.1 细胞株 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 细胞培养 |
| 2.2 不同的氧浓度对结肠癌HCT116细胞增殖的影响 |
| 2.3 PI染色法检测筛选的两种氧浓度对结肠癌HCT116细胞周期的影响 |
| 2.4 Annexin V-FITC/PI染色法检测两种氧浓度对HCT116 细胞凋亡的影响 |
| 2.5 q PCR检测两种氧浓度对结肠癌HCT116 细胞HIF-1αm RNA的表达情况 |
| 2.7 Western Blot检测两种氧浓度对结肠癌HCT116 细胞HIF-1α的表达情况 |
| 2.8 统计学方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 HCT116细胞增殖活性最强氧浓度的筛选结果 |
| 3.2 20%O_2和5%O_2氧浓度对结肠癌HCT116细胞周期的影响 |
| 3.3 5%O_2和20%O_2条件对结肠癌细胞凋亡的影响 |
| 3.4 5%O_2和20%O_2 条件对结肠癌HCT116 细胞HIF-1αm RNA表达的影响 |
| 3.5 5%O_2和20%O_2 条件对HCT116 细胞HIF-1α蛋白表达的影响. |
| 4 分析与讨论 |
| 5 小结 |
| 第三部分 养阴化瘀解毒方对低氧条件下结肠癌细胞增殖与凋亡的影响 |
| 1 实验材料和仪器 |
| 1.1 细胞株 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 细胞培养 |
| 2.2 实验分组 |
| 2.3 YYHYJDD含药血清对低氧条件下结肠癌HCT116 细胞MTS增殖检测 |
| 2.4 YYHYJDD含药血清对低氧条件下结肠癌HCT116 细胞AOEB凋亡形态学染色 |
| 2.5 YYHYJDD含药血清对低氧条件下结肠癌HCT116 细胞流式凋亡检测 |
| 2.6 Western blot检测YYHYJDD对结肠癌HCT116 细胞HIF-1 及下游Bcl-2、Bax、Caspase-3 前体相关靶蛋白的表达情况 |
| 2.7 统计学方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 YYHYJDD含药血清对低氧条件下结肠癌HCT116 细胞MTS增殖的影响 |
| 3.2 YYYYJDD含药血清干预结肠癌细胞后AOEB染色结果 |
| 3.3 YYHYJDD含药血清对HCT116 细胞流式凋亡检测结果 |
| 3.4 YYHYJDD含药血清对HCT116 细胞HIF-1α、Bcl-2、Bax、Caspase-3前体相关蛋白表达的影响 |
| 4 分析与讨论 |
| 5 小结 |
| 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 HIF-1与细胞增殖及抗肿瘤药物的相关研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简历 |
四、复方仙酥胶囊对人胃癌细胞凋亡及细胞周期的影响（论文参考文献）
- [1]益气消症颗粒联合化疗治疗气虚血瘀痰凝型晚期胃癌的临床研究[D]. 陈晓静. 山西中医药大学, 2021(09)
- [2]含斑蝥制剂联合化疗治疗胃癌疗效及安全性的Meta分析与考证研究[D]. 张燕娜. 北京中医药大学, 2021(08)
- [3]运化毒邪方及其有效成分控制胃癌的研究[D]. 戴小军. 扬州大学, 2020
- [4]九香虫血淋巴对小鼠乳腺癌移植瘤生长抑制作用[D]. 赵帅. 贵州大学, 2020(01)
- [5]四虫片对胃癌细胞生物学行为及瘀毒交阻型胃癌术后患者的影响和网络药理学研究[D]. 解广东. 山东中医药大学, 2020
- [6]复方苦参注射液对恶性T细胞淋巴瘤作用机制研究[D]. 郑佳彬. 中国中医科学院, 2020(01)
- [7]八宝丹通过调控mTOR通路抑制胃癌细胞增殖及诱导其凋亡和自噬的机制研究[D]. 尚海霞. 福建中医药大学, 2020(08)
- [8]新加良附方调控miR-34a/SIRT1/p53及Caspase凋亡通路抑制胃癌的机制研究[D]. 李亚. 北京中医药大学, 2020(04)
- [9]理气活血解毒法治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变的疗效与机制研究[D]. 黄佳钦. 北京中医药大学, 2020(04)
- [10]养阴化瘀解毒方对常氧和低氧条件下结肠癌细胞增殖与凋亡的影响[D]. 朱静. 江西中医药大学, 2020(05)