一、72h睡眠剥夺对大鼠循环免疫细胞的影响（论文文献综述）
张赛[1]（2021）在《右美托咪定对术后睡眠剥夺大鼠心肌细胞焦亡的作用及其机制研究》文中认为目的:通过模拟临床患者术后睡眠剥夺,采用大鼠制备模型,探讨术后睡眠剥夺心肌细胞焦亡机制及右美托咪定对其的影响。方法:清洁级健康成年雄性SD大鼠42只,体重250-275g,按照随机数字表法分为7组（n=6）:对照组（C）、手术组（O）、睡眠剥夺组（SD）、术后睡眠剥夺组（PSD）、术后睡眠剥夺+右美托咪定组（PSD+DEX）、术后睡眠剥夺+内质网应激激动剂TG组（PSD+TG）、术后睡眠剥夺+内质网应激激动剂TG+右美托咪定组（PSD+TG+DEX）。O组只行脾切除术。SD组采用改良多平台水环境睡眠剥夺法（Modified Multiple Platform Water Environmental Method,MMPWM）睡眠剥夺72h。PSD组先行脾切除术,待大鼠自然清醒后采用MMPWM睡眠剥夺72h。PSD+DEX组大鼠脾切除术自然清醒后,在睡眠剥夺开始以及睡眠剥夺24h,48h以25μg·kg-1的剂量腹腔内注射盐酸右美托咪定,余同PSD组。PSD+TG组大鼠脾切除术自然清醒后,在睡眠剥夺开始前30min以及给TG后24h,48h以3mg·kg-1的剂量腹腔内注射内质网应激激动剂TG,余同PSD组。PSD+TG+DEX组大鼠脾切除术自然清醒后,在睡眠剥夺开始前30min以及给TG后24h,48h以3mg·kg-1的剂量腹腔内注射TG且在睡眠剥夺开始以及睡眠剥夺24h,48h以25μg·kg-1的剂量腹腔内注射盐酸右美托咪定,余同PSD组。其余组在相同时间腹腔注射等量生理盐水。实验过程中观察各组大鼠的精神状态、行为及反应能力等一般状况。实验完成后取各组大鼠心脏组织,采用HE染色观察心肌组织结构的改变;Western Bolt法检测心肌组织中GRP78,PERK,TXNIP,NLRP3,cleaved caspase-1蛋白的表达。结果1各组大鼠一般情况比较:C组、O组大鼠一般情况好,精神佳,反应灵敏,毛发白且有光泽。SD组大鼠状态较好,易激怒、有攻击行为,皮毛蓬乱发黄、潮湿无光泽。PSD组大鼠精神萎靡,对外界刺激反应淡漠,脱毛现象严重。PSD+DEX组大鼠精神状态较差,反应迟钝,皮毛粗糙、蓬乱无光泽。PSD+TG组大鼠精神状态差、萎靡、烦躁不宁,皮毛暗黄、潮湿蓬乱无光泽。PSD+TG+DEX组大鼠精神差,行为呆板,皮毛黄杂乱无光泽。2各组大鼠体重的变化:C组、O组大鼠体重增加,SD组大鼠体重基本不变,而经过术后睡眠剥夺的PSD组、PSD+DEX组、PSD+TG组、PSD+TG+DEX组大鼠体重明显下降。3各组大鼠心肌组织结构改变:C组心肌细胞大小正常、结构完整,心肌肌原纤维结构连续有序、整齐排列。O组心肌细胞形态结构基本正常,细胞肿胀不明显,肌原纤维排列尚整齐。SD组心肌细胞肿胀,细胞核不规则,间质水肿,有炎性细胞浸润。PSD组、PSD+TG组、PSD+TG+DEX组心肌结构破坏,核固缩甚至碎裂,细胞水肿,可见空泡,心肌肌原纤维断裂、排列紊乱,大量炎性细胞浸润。PSD+DEX组心肌结构破坏少,偶见心肌细胞水肿,心肌纤维排列较整齐。4各组大鼠心肌组织相关蛋白表达量的改变:与C组比较,O组GRP78,PERK蛋白表达量增加（P<0.05）,SD组GRP78,PERK,TXNIP,NLRP3,cleaved caspase-1蛋白表达量增加（P<0.05）,PSD组、PSD+DEX组、PSD+TG组及PSD+TG+DEX组GRP78,PERK,NLRP3,cleaved caspase-1蛋白表达量显着增加（P<0.05）。与PSD组比较,PSD+DEX组GRP78,PERK,TXNIP,NLRP3,cleaved caspase-1蛋白表达量显着减少（P<0.05）。与PSD+TG组比较,PSD+TG+DEX组GRP78,TXNIP,NLRP3,cleaved caspase-1蛋白表达量减少（P<0.05）。结论:通过模拟临床患者术后睡眠剥夺,本实验发现右美托咪定可能通过抑制内质网应激减轻术后睡眠剥夺导致的心肌细胞焦亡。
贾丽妍,王钰雯,黄佳琦,陈耀星,王铁,曹静,董玉兰,王子旭[2]（2021）在《睡眠剥夺对哺乳动物消化系统的影响》文中进行了进一步梳理睡眠剥夺对动物和人体的生理结构和功能产生多方面的负面影响,可引发多种疾病甚至死亡,尤其与机体的消化吸收和新陈代谢等过程密切相关。作者主要围绕睡眠剥夺对胃、肠、肝脏等器官的结构和功能所造成的影响进行了归纳和总结,并针对睡眠剥夺对机体氧化应激水平、细胞因子浓度和激素分泌等产生影响,进而引起消化系统紊乱的可能机制进行了分析。除此之外,食物摄入等对睡眠剥夺动物的状态也有所影响。睡眠剥夺对消化系统的影响包括使消化道黏膜及肝细胞遭受损伤、胃运动功能下降、肠道菌群紊乱及胃肠激素、胰岛素分泌异常等,进而影响机体能量代谢,减缓其从损伤中恢复的速度,患各种恶性疾病的概率也增加。睡眠剥夺作为一种应激原,会显着提升机体的氧化应激水平,令细胞的代谢负担加大,多种生物大分子,特别是DNA被破坏;细胞因子如肿瘤坏死因子α（TNF-α）的释放增加则使炎症反应广泛发生;激素分泌也是这些损伤过程中的一环,若损伤不断发展,则导致患恶性肿瘤风险加剧。在实践也发现了一些可对睡眠剥夺状态产生影响的食物和药物,但其机制尚不明确。目前,针对睡眠剥夺对机体消化系统乃至全身范围内的损伤机制研究尚有许多空白,未来仍需进行广泛、深入的研究。
詹芬芳[3]（2021）在《睡眠剥夺对老龄大鼠术后认知功能及海马NLRP3-caspase-1信号通路的影响》文中研究表明目的:探讨术前睡眠剥夺对老龄大鼠术后认知功能及海马NLRP3-caspase-1信号通路的影响。方法:SFP级雄性SD大鼠60只,18～20月龄,体重500～650g,采用随机数字表法分为4组（n=15）。正常对照组（C组）、睡眠剥夺组（SD组）、手术组（S组）、睡眠剥夺+手术组（SD+S组）。C组正常饲养;SD组睡眠剥夺48h,S组行剖腹探查手术,SD+S组在睡眠剥夺48小时后行剖腹探查术。每组随机选取8只大鼠进行术后Morris水迷宫逃避潜伏期实验,总共训练5天;随后进行空间探索实验,检测大鼠穿过平台的次数;空间探索实验结束后立即将大鼠处死获取其海马,HE染色观察大鼠海马CA1区神经元变化,相关试剂检测海马区SOD和MDA的变化;采用实时荧光PCR（q PCR）测定各组大鼠海马组织中白介素-18（IL-18）和白细胞介素-1β（IL-1β）的含量;蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测海马组织NLRP3、Caspase-1、IL-1β及IL-18蛋白的表达。结果:（1）与C组相比,SD组、S组、SD+S组逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,海马IL-18、IL-1β含量升高,NLRP3、Caspase-1蛋白表达上调（P<0.05）,海马区SOD活性降低,MDA含量增加。（2）与S组和SD组相比,SD+S组逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,海马IL-18、IL-1β含量升高,NLRP3、Caspase-1蛋白表达上调（P<0.05）,海马区SOD活性降低,MDA含量增加。结论:术前睡眠剥夺导致并加重术后认知功能障碍,其机制与激活海马NLRP3-caspase-1信号通路诱导炎症反应有关。
肖永[4]（2019）在《PINK1/Parkin自噬信号通路在丙泊酚减轻睡眠剥夺诱发的大鼠海马神经元损伤中的作用》文中研究说明第一部分 丙泊酚辅助睡眠对睡眠剥夺后大鼠血清睡眠相关炎症因子和认知功能的影响目的:通过建立快动眼睡眠剥夺模型,观察丙泊酚辅助睡眠对睡眠剥夺后大鼠血清睡眠相关炎症因子和认知功能的影响。方法:选择9～12周龄、健康、体重260～320 g雄性Sprague-Dawley大鼠100只,随机分为正常对照组（C组）、睡眠剥夺组（SD组）、睡眠剥夺+脂肪乳剂组（SD-F组）、睡眠剥夺后30mg/kg丙泊酚辅助睡眠组（P30组）和睡眠剥夺后60mg/kg丙泊酚辅助睡眠组（P60组）,每组20只。SD组、SD-F组、P30组和P60组大鼠采用改良多平台水相睡眠剥夺模型对大鼠实施睡眠剥夺,连续睡眠剥夺96 h,C组饲养于无水睡眠剥夺装置内96 h;C组和SD组大鼠在睡眠剥夺完成后进行相关检测;SD-F组大鼠在完成睡眠剥夺后给予腹腔内注射10%脂肪乳1 mL,1 h后进行相关检测;P30组和P60组大鼠在睡眠剥夺完成后分别给予腹腔内注射丙泊酚30 mg/kg或60 mg/kg诱导其睡眠,待其自然苏醒后进行相关检测;水迷宫实验检测大鼠学习认知功能,HE染色观察大鼠下丘脑、海马、肾上腺和肝脏细胞形态学特征,透射电镜观察海马神经元形态学特征,ELISA检测血清睡眠相关炎症因子（IL-β、TNF-α）和细胞色素 C（cytochrome C,Cyt-C）的表达。结果:水迷宫行为学检测结果:与C组比较,SD组、SD-F组大鼠逃避潜伏期延长、空间探索次数下降（P<0.05）;与SD组比较,SD-F组逃避潜伏期和空间探索次数结果无统计学差异,P30组和P60组大鼠逃避潜伏期降低而空间探索次数增加（P<0.05）。HE检测显示:C组大鼠下丘脑、海马、肾上腺和肝脏结构正常,细胞密集、胞浆饱满、核仁清晰,SD组、SD-F组、P30组和P60组大鼠下丘脑HE染色与C组无明显差异,但肾上腺和肝脏组织均呈现细胞肿胀、细胞间隙增大、排列疏松、色淡且染色不均;SD组和SD-F组海马CA1区椎体细胞层次减少、细胞间隙增宽、存在细胞缺失现象,P30组和P60组海马CA1区锥体细胞排列较SD组和SD-F组为紧密、细胞缺失现象少。透射电镜显示:C组大鼠海马CA1区神经元核膜完整、核形态规则、染色质分布均匀;SD组和SD-F组海马CA1区神经元出现核固缩、核碎裂以及染色质边集等现象,可见凋亡小体;P30组和P60组海马神经元核膜完整、染色质分布尚为均匀,染色质边集不明显,未见凋亡小体。ELISA检测大鼠血清中IL-1β、TNF-α和Cyt-C的表达结果显示:与C组比较,其余四组大鼠血清中IL-1β和TNF-α的表达均增高（P<0.05）;与SD 比较,SD-F组的结果无统计学差异,P30组和P60组大鼠血清中IL-1β和TNF-α含量增高而Cyt-C的表达下降（P<0.05）;与C组比较,SD组和SD-F组大鼠血清中Cyt-C表达均增高（P<0.05）,P30组和P60组大鼠血清中Cyt-C的表达均无统计学差异。结论:睡眠剥夺可导致大鼠多脏器细胞形态受影响,丙泊酚诱导睡眠可增高睡眠剥夺后大鼠血清IL-1β和TNF-α的表达水平、降低Cyt-C表达水平,减轻海马CA1区神经元凋亡、改善睡眠剥夺后大鼠的认知功能损伤。第二部分 丙泊酚辅助睡眠对睡眠剥夺后大鼠海马神经元线粒体的影响目的:研究丙泊酚辅助睡眠对睡眠剥夺后大鼠海马神经元线粒体形态和功能的影响,探讨丙泊酚改善睡眠剥夺后大鼠海马认知功能的可能机制。方法:选择9～12周龄、健康、体重260～320 g雄性Sprague-Dawley大鼠87只,分为正常对照组（C组,n=15）、睡眠剥夺组（SD组,n=27）、睡眠剥夺+脂肪乳剂组（SD-F组,n=15）、睡眠剥夺后30 mg/kg丙泊酚辅助睡眠组（P30组,n=15）和睡眠剥夺后60 mg/kg丙泊酚辅助睡眠（P60组,n=15）;采用改良多平台水相睡眠剥夺法对大鼠实施睡眠剥夺,连续睡眠剥夺96 h,C组饲养于无水睡眠剥夺装置内饲养96 h。C组和SD组大鼠完成干预后进行相关检测;SD-F组大鼠在完成睡眠剥夺后,给予腹腔内注射10%脂肪乳1 mL,1h后进行相关检测;P30组和P60组大鼠在完成睡眠剥夺后,每只动物给予腹腔内注射丙泊酚30 mg/kg或60 mg/kg诱导其睡眠,待其自然苏醒后进行相关检测。透射电镜观察海马神经元线粒体形态学变化;ELISA检测海马组织内睡眠相关炎症因子（IL-1β和TNF-α）、细胞色素C（cytochrome C,Cyt-C）和ATP的表达,同时检测SD组睡眠剥夺后第48 h和第72 h大鼠海马IL-1 β、TNF-α和Cyt-c c的表达水平;免疫组化检测海马CA1区神经元cleaved caspase-3蛋白阳性率,蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3的相对表达量。结果:透射电镜结果显示:C组线粒体大小均一、外膜光滑、线粒体嵴清晰可见、线粒体内无空泡,SD组和SD-F组线粒体大小不一、线粒体外膜边缘毛糙、内部有大量空泡、线粒体嵴模糊不清,可见自噬征象;P30组和P60组大鼠海马线粒体外膜边缘光滑、线粒体嵴清晰可见、线粒体内空泡少见。ELISA检测结果显示:与C组比较,SD组和SD-F组大鼠海马组织内IL-1β和ATP表达水平降低（P<0.05）,TNF-α和Cyt-C表达水平增高（P<0.05）;与SD 组比较,SD-F 组 IL-1β、TNF-α、Cyt-C 和 ATP 表达水平无统计学差异,P30组和P60组海马组织内IL-1 β表达水平增高（P<0.05）、TNF-α和Cyt-C表达水平降低（P<0.05）,P60组海马组织内ATP表达水平增高（P<0.05）。ELISA检测不同睡眠剥夺时点大鼠海马炎症因子和Cyt-C表达:与C组比较,睡眠剥夺后48 h、72 h和96 h后大鼠海马组织内IL-1β表达水平均降低（P<0.05）、TNF-α表达水平增高（P<0.05）,而睡眠剥夺72 h和96 h后大鼠海马组织内Cyt-C表达水平增高（P<0.05）;与睡眠剥夺48 h组比较,睡眠剥夺96 h后大鼠海马组织内IL-1β含量降低（P<0.05）、TNF-α表达水平增高（P<0.05）,睡眠剥夺72 h和96 h后大鼠海马组织内Cyt-C表达水平增高（P<0.05）。免疫组化检测结果:与C组比较,其余各组海马CA1区神经元细胞cleaved caspase-3阳性率增加（P<0.05）;与SD组比较,SD-F组海马CA1区神经元细胞cleaved caspase-3阳性率无统计学差异,P30组和P60组海马CA1区神经元细胞cleaved caspase-3阳性率下降（P<0.05）。蛋白免疫印迹法检测结果:与C组比较,SD 组和 SD-F 组 Bcl-2 蛋白表达量降低（P<0.05）、Bax 和 cleaved caspase-3蛋白表达量增高（P<0.05）,P30组和P60组Bcl-2和Bax蛋白表达无统计学差异;与SD组比较,P30组和P60组Bax和cleaved caspase-3蛋白表达量下降（P<0.05）。结论:丙泊酚辅助睡眠后可逆转睡眠剥夺导致的大鼠海马组织内IL-1β表达水平的下降以及TNF-α、细胞色素C、Bax和cleaved caspase-3表达水平的升高;丙泊酚诱导睡眠可减轻睡眠剥夺诱发的大鼠海马神经元线粒体损伤和凋亡。第三部分 PINK1/Parkin自噬信号通路在丙泊酚辅助睡眠减轻睡眠剥后大鼠海马神经元线粒体损伤中的作用目的:探讨PINK1/Parkin自噬信号通路在丙泊酚诱导睡眠减轻睡眠剥夺后大鼠海马神经元线粒体损伤中的作用。方法:选择9～12周龄、健康、体重260～320 g雄性Sprague-Dawley大鼠181只,采用改良多平台水相睡眠剥夺法建立大鼠的REM睡眠剥夺模型,连续睡眠剥夺96小时。首先探讨不同剂量丙泊酚对海马组织内自噬蛋白Beclin1相对表达的影响,大鼠分为:正常对照组（C组）、睡眠剥夺组（SD组）、睡眠剥夺+丙泊酚5 mg/kg组（P5组）、睡眠剥夺+丙泊酚10 mg/kg组（P10组）、睡眠剥夺+丙泊酚15 mg/kg组（P15组）、睡眠剥夺+丙泊酚30 mg/kg组（P30组）、睡眠剥夺+丙泊酚45 mg/kg组（P45组）和睡眠剥夺+丙泊酚60mg/kg组（P60组）,每组3只,蛋白免疫印迹法检测自噬相关蛋白Beclin1的相对表达量。其次探讨自噬在睡眠剥夺后大鼠海马认知功能损伤的作用,大鼠分为:正常对照组（C组）、睡眠剥夺组（SD组）、睡眠剥夺+脂肪乳剂组（SD-F组）、睡眠剥夺+丙泊酚30 mg/kg组（P组）、睡眠剥夺+雷帕霉素0.5 mg/kg组（R组）、睡眠剥夺+雷帕霉素0.5 mg/kg+丙泊酚30 mg/kg组（PPR组）、睡眠剥夺+3-MA0.5 mg/kg组（3-MA组）和睡眠剥夺+3-MA 0.5 mg/kg+丙泊酚30mg/kg组（PM组）,每组14只,水迷宫行为学检测大鼠认知功能改变,透射电镜观察海马神经元形态学改变,蛋白免疫印迹法检测海马组织自噬相关蛋白Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ的相对表达。最后探讨PINK1/Parkin自噬信号通路在丙泊酚减轻大鼠睡眠剥夺后海马线粒体损伤中的作用,大鼠分为:正常对照组（C组）、睡眠剥夺组（SD组）、睡眠剥夺+脂肪乳剂组（SD-F组）、睡眠剥夺后30 mg/kg丙泊酚辅助睡眠组（P30组）和睡眠剥夺后60mg/kg丙泊酚辅助睡眠（P60组）,每组9只;qRT-PCR检测海马组织自噬相关蛋白PINK1、Parkin、LC3基因的mRNA相对表达水平,免疫组化观察海马CA1区神经元PINK1、Parkin和LC3蛋白阳性率,Western blot检测海马组织自噬相关蛋白PINK1、Parkin、p62、Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ的相对表达量。结果:1.不同剂量丙泊酚对海马组织自噬蛋白Beclin1蛋白相对表达量的影响结果:与C组比较,SD组、P5组、P10组和P15组Beclin1蛋白相对表达量增高（P<0.05）;与SD组比较,P30组、P45组和P60组Beclin1蛋白相对表达量均降低（P<0.05）;分别与P5组、P10组和P15组比较,P30组、P45组和P60组Beclin1蛋白相对表达量均为降低（P<0.05）。2.自噬在睡眠剥夺后大鼠海马认知功能损伤的作用:水迷宫行为学第5日测试结果:与C组比较,SD组、SD-F组、PR组和R组大鼠逃避潜伏期延长（P<0.05）,P组、PM组和3-MA组大鼠逃避潜伏期无统计学差异;与R组比较,P组、PM组和3-MA组大鼠逃避潜伏期均降低（P<0.05）。空间探索实验结果:与C组相比,SD组、SD-F组、PR组、R组大鼠穿越平台次数下降（P<0.05）;与SD组比较,P组、PM组和3-MA组大鼠空间探索次数上升（P<0.05）。透射电镜观察海马神经元显示:SD组、SD-F组、R组和PR组线粒体被膜结构包绕形成吞噬泡,部分呈现典型的花生状,线粒体内线粒体嵴形态模糊;C组、P组、3MA组和PM组电镜图显示神经元线粒体被膜结构包绕少见;Western blot自噬相关蛋白检测显示:与C组比较,SD组、SD-F组和R组LC3 Ⅱ/Ⅰ和Beclin1蛋白相对表达量增高（P<0.05）;分别与SD组、SD-F组、R组和PR组比较,P组、PM组和3-MA组Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白相对表达量均降低（P<0.05）。3.探讨PINK1/Parkin自噬信号通路在丙泊酚减轻睡眠剥夺后大鼠海马神经元损伤中作用:qRT-PCR检测自噬相关蛋白基因mRNA的相对表达水平结果:与C组相比较,海马组织中自噬相关蛋白PINK1、Parkin、LC3基因mRNA相对表达水平在SD组和SD-F组增高（P<0.05）,在P30组和P60组降低（P<0.05）;与SD组比较,P30组和P60组海马组织中自噬相关蛋白PINK1、Parkin、LC3基因mRNA的表达水平下降（P<0.05）。免疫组化检测各组大鼠海马CA1区神经元PINK1、Parkin、LC3蛋白阳性率:与C组比较,SD组、SD-F组和P30组海马CA1区神经元PINK1、Parkin、LC3蛋白阳性率增加（P<0.05）;与SD组比较,SD-F组组海马CA1区神经元PINK1、Parkin、LC3蛋白阳性率无统计学差异,P30组和P60组海马CA1 区神经元 PINK1、Parkin、LC3 蛋白阳性率降低（P<0.05）。Western blot检测PINK1、Parkin、Beclin1、P62和LC3蛋白相对表达量结果:与C组比较,SD组和SD-F组PINK1、Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白相对表达量增高（P<0.05）,SD组Parkin蛋白和p62蛋白相对表达量升高（P<0.05）;与SD组比较,P30组和P60组PINK1、Beclin1、p62、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白相对表达量降低（P<0.05）。结论:睡眠剥夺可能通过增强大鼠海马线粒体自噬,导致认知功能损伤;丙泊酚辅助睡眠可减轻大鼠海马线粒体自噬,改善睡眠剥夺诱发的大鼠认知功能损伤,这可能丙泊酚与抑制PINK1/Parkin线粒体自噬信号通路有关。
王久太[5]（2019）在《PPARγ途径改善妊娠期间睡眠剥夺子代认知功能的机制研究》文中研究表明妊娠期间母亲睡眠缺失是一个严峻的社会现象。睡眠时长和质量的降低会对孕妇本身和胎儿产生极大的影响,已有不少临床研究表明这种危害可能会导致婴儿早产、畸形、剖腹产概率升高,还会增加孕妇产后抑郁的风险。但是,基础科学研究的报道十分稀缺。我们前期的实验研究表明,大鼠妊娠期间的睡眠剥夺会导致子代出现严重的认知障碍和情感障碍,并已经阐明神经炎症在其中扮演了关键角色。因此,有必要寻找一个直接有效的靶标干预这种状况,同时探明其中的病理机制。大量的研究数据表明PPARγ途径能够调节炎症反应。是否可以通过PPARγ途径的干预手段来调节睡眠剥夺引起的子代神经炎症与认知功能异常是我们研究的方向。我们以妊娠期间母亲睡眠剥夺（Maternal Sleep Deprivation,MSD）的大鼠作为实验模型,以Morris水迷宫检测子代认知损伤情况,以qRT-PCR和Western blot检测PPARγ以及其它细胞因子的表达情况,用免疫荧光染色的方法鉴定小胶质细胞状态和神经发生状况。检测结果发现,MSD子代认知损伤伴随着PPARγ分子表达的降低。小胶质细胞作为中枢神经系统的免疫细胞,对于神经炎症的调控发挥着关键的作用。免疫荧光染色的结果表明MSD子代小胶质细胞呈现出显着的激活状态,具体表现为促炎的M1型。以PPARγ的激动剂pioglitazone和拮抗剂GW9662来激活和抑制PPARγ途径,发现PPARγ激活后使M1型小胶质细胞趋向于抗炎的M2型状态。免疫荧光染色的结果显示MSD子代存在神经发生的显着减少,而PPARγ干预后显着增强了MSD子代的神经发生,这其中M2型小胶质细胞起到了抑制神经炎症促进神经发生的作用,体外实验验证结果亦是如此。神经发生对于认知损伤的改善起着关键作用,为了进一步证明神经发生在PPARγ途径中的作用,我们采用Temozolomide（TMZ）抑制神经发生,实验数据表明,当神经发生受损,PPARγ对于MSD子代认知损伤的改善也随之消失。综上所述,PPARγ途径可以通过调节小胶质细胞M1/M2激活表型,介导神经发生,最终改善MSD子代的认知损伤。这为母亲睡眠剥夺子代认知缺陷的改善和相关精神类疾病的预防和治疗提供了科学研究指导。
沈倩妮[6]（2019）在《视交叉上核Egr基因振荡紊乱在围术期痛觉过敏中的作用及机制研究》文中研究说明第一部分七氟醚吸入麻醉对急性REM睡眠剥夺大鼠痛觉过敏的影响目的:探讨七氟醚吸入麻醉是否加重急性REM睡眠剥夺大鼠痛觉过敏,及其痛觉过敏的程度。方法:选取10月龄大小雄性SPF级健康Sprague-Dawley大鼠共76只,每只体重约为300g,采用随机数字表法分为4组（n=19）:睡眠剥夺组（SD组）,大鼠于睡眠剥夺水笼中行96hr急性REM睡眠剥夺;七氟醚吸入麻醉组（SEV组）,大鼠放置入SD组旁有平台无水笼中96hr后于吸入麻醉玻璃箱中给予2.5%七氟醚吸入3hr;睡眠剥夺+七氟醚吸入麻醉组（SD+SEV组）,大鼠先于睡眠剥夺水笼中行96hr急性REM睡眠剥夺后再于吸入麻醉玻璃箱中给予2.5%七氟醚吸入3hr;正常对照组（Control组）,大鼠于SD组旁有平台无水笼中未行其他特殊处理。分别于睡眠剥夺前（T0）、七氟醚吸入后1d、3d和7d（T1-3）测定机械缩足反射阈值MWT;测定大鼠七氟醚吸入后苏醒时间。结果:1.与Control组比较,SD组、SEV组在T0-3时MWT降低（P<0.05）;2.与SD组比较,SD+SEV组在T0-3时MWT降低（P<0.05）;3.与其他组比较,SD+SEV组的MWT在T1-T3时进行性降低（P<0.05）,MWT恢复时间较前延长（P<0.05）,而术后苏醒时间无明显差别（P﹥0.05）。结论:七氟醚吸入麻醉会加重急性REM睡眠剥夺大鼠痛觉过敏并延长其恢复时间。第二部分视交叉上核Egr基因信号通路调控围术期痛觉过敏的机制目的:探讨Egr基因信号通路在急性REM睡眠剥夺大鼠经七氟醚麻醉后产生痛觉过敏中的调控作用。方法:选取10月龄大小雄性SPF级健康SD大鼠共72只,采用随机数字表法分为4组:睡眠剥夺组（SD组,n=18）,大鼠于睡眠剥夺水笼中行96hr急性REM睡眠剥夺;七氟醚吸入麻醉组（SEV组,n=18）,大鼠放置入SD组旁有平台无水笼中96hr后给予2.5%七氟醚吸入3hr;睡眠剥夺+七氟醚吸入麻醉组（SD+SEV组,n=18）,大鼠先行96 h急性REM睡眠剥夺后再给予2.5%七氟醚吸入3 hr;正常对照组（Control组,n=18）,大鼠于SD组旁有平台无睡眠剥夺笼中饲养,未行其他特殊处理。分别于七氟醚吸入后1 d、3 d和7 d（T1-3）处死大鼠,取大鼠视交叉上核组织采用western印迹分析Egr-1和Egr-2的表达水平;采集大鼠静脉血样,采用ELISA法检测血清IL-2、Egr-1和Egr-2的浓度;取大鼠脊髓背根神经节组织行免疫组织化学染色分析IL-2的表达。结果:1.与Control组比较,SD组、SD+SEV组T1-3时视交叉上核Egr-1和Egr-2表达上调（P<0.05）,SEV组T1-3时视交叉上核Egr-1表达上调,T1时Egr-2表达上调（P<0.05）;与SD组、SEV组比较,SD+SEV组T1-3时Egr-1和Egr-2表达上调（P<0.05）;2.与Control组比较,SD组、SEV组、SD+SEV组血清Egr-1、Egr-2、IL-2增高（P<0.05）。与SD组、SEV组比较,SD+SEV组血清Egr-1、Egr-2、IL-2增高（P<0.05）。SD组血清Egr-2随着时间的延长表达降低（P<0.05）,SEV组血清Egr-2随着时间的延长表达降低（P<0.05）;3.与Control组比较,SD组、SEV组T1-3时脊髓IL-2表达阳性细胞IOD增高;与SD组、SEV组比较,SD+SEV组T1-3时脊髓IL-2表达阳性细胞IOD增高（P<0.05）。结论:急性REM睡眠剥夺后行七氟醚麻醉可能通过Egr/IL-2信号通路诱发痛觉过敏。
邢陈,顾晔,徐秀段,邹书仙,胡永亮,胡美茹,宋伦[7]（2017）在《睡眠剥夺对大鼠脾脏淋巴细胞生物钟基因表达水平的影响》文中研究表明目的探讨72 h睡眠剥夺（sleep deprivation,SD）对大鼠脾脏淋巴细胞生物钟基因表达水平的影响。方法将大鼠随机分为正常对照组和SD组。SD组大鼠使用SD仪进行睡眠剥夺72 h后,取脾脏制备成单细胞悬液,利用淋巴细胞分离液获得淋巴细胞;分别通过RT-PCR和免疫印迹方法检测大鼠脾淋巴细胞中生物钟基因mRNA和蛋白水平的变化。结果与正常对照组相比,SD组大鼠脾脏生物钟基因bmal1、clock、per2、rev-erbα的mRNA相对表达水平呈现显着下调,而npas2、per1、rorα、cry1 mRNA相对表达水平无显着变化。与正常对照组相比,72 h SD后脾脏淋巴细胞BMAL1、NPAS2、CRY1、RORα蛋白表达水平显着下调,PER1蛋白表达水平呈升高趋势,而REVERBα蛋白表达水平无显着变化。结论 72 h SD应激条件可在转录和翻译水平诱导大鼠脾多种核心生物钟基因表达水平发生异常改变。
韩晨霞[8]（2017）在《基于线粒体生物合成探讨中枢疲劳的中医证候及生物学机制》文中进行了进一步梳理目的本研究拟通过对古代文献的整理和分析,分别从概念、范畴、症状和证候特征等方面对中枢疲劳的中医理论进行分析和归纳。在此基础上,结合现代医学研究进展,探讨线粒体生物合成和中枢疲劳肝郁脾虚证候生物学机制的相关性。并从肝脾论治的角度探讨中药组方——体复康加减方的治疗依据。实验研究中,建立并评价中枢疲劳大鼠模型。在此基础上评价体复康加减方的药效,进而从物质能量代谢、氧化作用、线粒体功能及形态逐级深入探讨中枢疲劳肝郁脾虚证的生物学机制和中药药理机制。最后检测线粒体生物合成重要通路SIRT1-PGC1α-NRF1各分子指标基因和蛋白的表达变化,明确体复康加减方基于中枢线粒体生物合成的作用分子靶点,为临床干预提供研究思路和基础。方法理论研究:首先通过对中枢疲劳相关的名词术语进行整理,采用工具书查询对应含义。其次,以中枢疲劳相关基础核心词"疲"、"劳"、"倦"分别作为检索词,检索第五版《中华医典》,筛选相关古代文献对应条文进行整理,分析中枢疲劳在中医理论中的对应症、和证的相关记载。同时,通过现代国内外文献检索,探讨基于线粒体生物合成中枢疲劳和肝郁脾虚证的相关性。最后,提出从肝脾论治的角度归纳体复康加减方治疗中枢疲劳的理论依据。实验研究:中枢疲劳大鼠模型建立和评价中,将大鼠随机分为四组:正常组,5天模型组,14天模型组,21天模型组。实验结束后采用一般情况观察（神态、毛发等）,行为学实验（旷场实验、高架十字迷宫实验、负重力竭游泳实验）,和线粒体超微结构评价模型,筛选出最优模型。给药实验中,将大鼠随机分为六组:正常组,模型组,体复康加减方低、中、高剂量组,阳性对照组。首先通过一般情况和行为学结果评价药效,并通过药效反证中枢疲劳肝郁脾虚病证结合模型。其次通过对外周血血清CK、BUN、LDH以及肝脏MDA、SOD检测,探讨能量代谢和氧化作用机制。进而通过透射电镜观察海马CA1区线粒体形态变化,同时通过RT-PCR实验检测mtDNA拷贝量,进一步探讨中枢疲劳肝郁脾虚证大鼠模型线粒体功能变化。最后,通过免疫组化、Western blot和RT-PCR实验分别检测SIRT1、PGC-1α、以及NRF1蛋白和基因表达变化。由浅及深,逐层分析中枢疲劳肝郁脾虚证的生物学机制和体复康加减方的分子作用靶点。结果理论研究:（1）中枢疲劳在中医理论中与"神劳"、"志倦"所表达的含义最为接近。其症状表现为"神劳则魂魄散,志意乱",集中体现在精神意识活动的功能下降,本体感知下降,提示高级中枢的认知、主观控制和驾驭情绪的功能下降。这和中枢疲劳中枢神经系统功能下降涉及认知、情绪的临床表现相符合。中枢疲劳的病机与阴阳、气血、五脏都有着密切关联。临床上由于诱导因素和各体本身差异的不同,又可表现出不同的证候特点。肝脾两脏的功能互相影响,其二者的调摄、协同在中枢疲劳的发生过程中起到核心作用。肝脾本身脏腑功能的特点,加之现代人群的起居作息以及饮食特征,导致肝郁脾虚成为现代人群中枢疲劳的主要证候特征。（2）中枢疲劳和肝郁脾虚证的生物学机制都与线粒体生物合成密切相关。肝郁状态下,人体处于长期压力和应激刺激,线粒体生物合成系统的神经保护作用被减弱,生物合成效率降低,膜电位流动性下降,中枢神经细胞线粒体功能障碍,引起HPA轴递质释放失衡,则体现为情绪躁怒或压抑。同时,脾虚状态下,线粒体生物合成机制受损,功能下降的线粒体无法通过正常的生物合成,以新陈代谢的形式合成新的线粒体蛋白和基因,从而导致线粒体能量代谢功能降低,ATP合成和加工效率下降,无法将营养物质充分转化为能量,在机体则宏观表现为水谷精微运送失职,周身不荣。另一方面,线粒体生物合成调控线粒体自身的新陈代谢,维持着线粒体蛋白和基因的质量和数量正常。其工作效率下降,导致线粒体DNA数量减少,线粒体形态改变,出现线粒体肿胀,空泡样变化,这一反应与脾虚水湿内停的宏观表征也具有一致性。（3）在对中枢疲劳肝郁脾虚证候特点把握的基础上,提出了从肝脾论治中枢疲劳的治疗思路,并为疏肝健脾方一一体复康加减方治疗中枢疲劳肝郁脾虚证提供了理论依据,进一步证实了从肝脾论治中枢疲劳的科学性和可行性。实验研究:（1）模型评价研究结果显示,与正常组相比,旷场实验结果提示5天（p<0.05）和14天（p<0.01）造模均可造成大鼠中央格停留时间升高。高架十字迷宫结果显示21天模型组大鼠开放臂进入次数（p<0.05）和时间（p<0.001）较正常组显着降低。14天和21天模型组大鼠负重游泳力竭时间较正常组减少（p>0.05）;此外21天模型组大鼠海马线粒体出现明显肿胀、脊断裂并消失以及双层膜结构损坏的退行性改变。（2）体复康加减方干预后行为学实验结果显示,和模型组相比,旷场实验中,中药低、中、高剂量组和阳性对照组均降低了中央格停留时间（P＜0.001）、总穿格距离（P<0.01,P<0.05,p>0.05,p>0.05）、总穿格次数（P<0.05,p>0.05,p>0.05,p>0.05）、最大连续活动距离（P<0.01,p>0.05,P<0.05,p>0.05）以及平均速度（P<0.01,p>0.05,p>0.05,p>0.05）;增加了垂直活动时间（p>0.05,p>0.05,P<0.01,P<0.01）、修饰时间（P<0.05,P<0.01,p>0.05,p>0.05）和修饰次数（P<0.05,P<0.01,p>0.05,P<0.05）。高架十字迷宫实验结果显示,和模型组对比,各治疗组均增高了高架开放臂进入次数（p<0.01,P<0.05,P<0.01,P<0.01）和时间（P<0.01,p>0.05,p>0.05,P<0.01）比例,以及中央格停留时间（P<0.001,P<0.05,P<0.05,P<0.05）。负重力竭游泳实验结果显示,各治疗组较模型组均延长了大鼠负重力竭游泳的力竭时间（P<0.001）。（3）和模型组相比,中药低、中、高剂量组和阳性对照组显着降低了血清CK（P<0.01,P<0.05,P<0.01,p>0.05）和 BUN（P<0.001）;均可升高肝脏 SOD 的活性（P<0.01,P<0.001,P<0.01,P<0.001）,并降低肝脏 MDA含量（P<0.001,P<0.001,P<0.001,P<0.01）。（4）透射电镜观察显示,中药低、中、高剂量组和阳性对照组均改善了线粒体超微结构的退行性变化,包括线粒体数量减少、线粒体肿胀、脊断裂或消失和双层膜结构破坏。和模型组对比,中药低、中、高和阳性对照组均增高了海马mtDNA拷贝量（P<0.01,P>0.05,P<0.01,p>0.05）。（5）免疫组化结果显示,中药低、中、高剂量和阳性对照组海马中SIRT1（P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.01）、PGC-1α（p>0.05）、NRF1（P<0.01,P<0.05,P<0.001,P<0.001）免疫阳性物表达均高于模型组。Western blot实验结果显示,中药低、中、高剂量组和阳性对照组大鼠海马 SIRT1（P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.01）、PGC-1α（P<0.05,P<0.001,P<0.001,P<0.001）、NRF1（P<0.05,P<0.001,P<0.001,P<0.01）蛋白表达均高于模型组。RT-PCR结果显示,中药低、中、高剂量组和阳性对照组大鼠海马 SIRT1（p>0.05）、PGC-1α（P ＜ 0.01,p>0.05,p>0.05,P<0.01）、NRF1（p>0.05,P<0.05,P<0.01,P<0.01）mRNA表达均高于模型组。结论中医理论中没有明确的概念和定义对应中枢疲劳,然而"神劳"（以及"志倦"）的表达与之较为接近。中枢疲劳的证候特点集中体现为肝郁脾虚,中医临床可从疏肝健脾的角度治疗。中枢疲劳肝郁脾虚证的生物学基础和中枢神经系统细胞内线粒体生物合成机制密切相关。21天水环境小平台造模方法较符合中枢疲劳模型的表观效度、构建效度和预测效度。经行为学实验、线粒体超微结构观察、以及分子生物学实验证实,以疏肝健脾为治则的体复康加减方可以有效改善中枢疲劳大鼠模型的相关症状,其改善作用涉及加速能量代谢产物消除和提高抗氧化酶活性,分子生物学机制与上调海马SIRT1-PGC-1α-NRF1通路蛋白和基因表达,从而促进线粒体生物合成密切相关。
兰芳[9]（2016）在《硫化氢抑制神经炎症拮抗睡眠剥夺所致大鼠抑郁和焦虑行为》文中进行了进一步梳理【研究背景与目的】最近研究发现睡眠剥夺（Sleep deprivation,SD）增加抑郁或焦虑的风险,是抑郁症的一项独立危险因子。神经炎症反应在抑郁症的发生、发展中至关重要,调控炎症反应对其具有潜在的治疗意义。硫化氢（Hydrogen sulfide,H2S）作为一种新型的神经调质及气体信号分子,具有神经保护、调节突触可塑性和抗神经炎症的作用。我们实验室的前期研究结果表明H2S对糖尿病大鼠的抑郁和急性应激所致抑郁均有改善作用。因此,本研究拟探讨:（1）SD是否可诱导大鼠抑郁和焦虑行为,及促进神经炎症反应?（2）H2S是否可拮抗SD所致大鼠抑郁和焦虑行为,其机理是否涉及到调控神经炎症反应?【方法】采用改良多平台水环境法（Modified multiple platform method,MMPM）建立SD模型;新环境进食抑制试验（novelty-suppressed feeding test,NSFT）、强迫游泳实验（forced swimming test,FST）和悬尾实验（tail suspension test,TST）检测大鼠抑郁行为;高架十字迷宫实验（elevated plus-maze test,EPMT）检测大鼠焦虑行为;自发活动评价大鼠运动量;酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA）检测大鼠脑内促炎症细胞因子（IL-1β、IL-6和TNF-α）,抗炎症细胞因子（IL-4和IL-10）及趋化因子（CCL2和CX3CL1）含量;免疫荧光（Immunofluorescence,IF）技术检测大鼠脑内巨噬细胞和活化的星形胶质细胞的数量。【结果】1.SD诱导大鼠抑郁和焦虑行为。对Wistar大鼠进行72 h SD后,所有大鼠予以行为学测试。结果显示:与对照组相比,SD大鼠在NSFT中进食潜伏期延长;FST中不动时间延长,攀爬时间缩短;TST中不动时间延长;EPMT中开放臂停留时间和进入次数比减少;自发活动无明显差异。这些表明SD可诱导大鼠抑郁和焦虑行为。2.SD促进大鼠神经炎症反应。对大鼠脑内炎症水平进行检测,结果示:SD诱导大鼠脑内促炎症细胞因子（IL-1β、IL-6和TNF-α）升高及抗炎症细胞因子（IL-4和IL-10）降低、巨噬细胞和活化的星形胶质细胞数量增加、趋化因子（CCL2和CX3CL1）含量增加,表明SD可诱导大鼠神经炎症反应。3.H2S拮抗SD诱导大鼠抑郁和焦虑行为。Na HS（H2S供体,30和100μmol/Kg/d,10 d）明显缩短SD大鼠在NSFT中的进食潜伏期和FST中的不动时间,并增加其攀爬时间;同时显着减少SD大鼠在TST中的不动时间,表明H2S可拮抗SD大鼠的抑郁行为。EPMT结果显示:Na HS（30和100μmol/Kg/d）明显增加SD大鼠的开放臂停留时间和开放臂进入次数比,对总进臂次数无影响,表明H2S可拮抗SD大鼠的焦虑行为。此外,Na HS（30和100μmol/Kg/d）对自发活动无影响,表明H2S不改变大鼠的运动量。4.H2S逆转SD诱导大鼠神经炎症反应。Na HS改善SD所致大鼠脑内促炎症细胞因子（IL-1β、IL-6和TNF-α）的升高及抗炎症细胞因子（IL-4和IL-10）的降低、巨噬细胞和活化的星形胶质细胞的数量增加及趋化因子（CCL2和CX3CL1）的含量增加,表明H2S可逆转SD诱导大鼠神经炎症反应。【结论】1.睡眠剥夺可诱导大鼠抑郁和焦虑行为,并促进神经炎症反应。2.硫化氢可拮抗睡眠剥夺所致大鼠抑郁和焦虑行为,其机理涉及抑制神经炎症反应。
窦伟,李振,张照环,黄流清,赵忠新[10]（2015）在《细胞型朊蛋白介导的海马神经元轴突延伸障碍可能参与睡眠剥夺后认知障碍》文中进行了进一步梳理目的研究快速眼动睡眠剥夺后大鼠空间记忆功能和海马细胞型朊蛋白（cellular prion protein,PrPC）表达的变化及沉默细胞型朊蛋白对体外培养的海马神经元轴突延伸的影响,探讨睡眠剥夺后认知功能变化的机制。方法成年SD大鼠按体重大小排序,完全随机法分为3组,分别为正常笼养对照组、水槽对照组、睡眠剥夺组。采用改良多平台睡眠剥夺法进行连续72 h快速眼动睡眠剥夺。采用Morris水迷宫评估空间记忆。用蛋白质印迹法检测睡眠剥夺后各组大鼠海马PrPC表达的变化。使用原代培养的海马神经元,用RNA干扰技术沉默PrPC,观察神经元轴突延伸的变化。结果大鼠睡眠剥夺后空间记忆受损,睡眠剥夺组穿越平台次数（3.17±0.95）较笼养对照组（7.17±0.95）和水槽对照组（6.50±0.62）明显减少（Z=2.026 6,Z=2.026 6,P<0.05）,平台接近平均值（mm）睡眠剥夺组（711.74±33.99）较笼养对照组（592.32±31.31）和水槽对照组（580.86±11.36）明显增大（Z=-2.001 6,Z=-2.482 0,P<0.05）。睡眠剥夺后海马PrPC的表达睡眠剥夺组（0.33±0.10）较笼养对照组（1.01±0.33）和水槽对照组（0.96±0.27）明显下调（Z=2.152 9,Z=2.152 9,P<0.05）。沉默PrPC导致原代培养的海马神经元轴突延伸障碍,感染组神经元（326.28±12.53）与未感染组（555.00±30.43）和感染阴性对照组（558.70±23.10）比较,轴突长度（μm）明显变短（Z=4.768 4,Z=4.877 0,P<0.05）。结论睡眠剥夺后PrPC介导的海马新生神经元轴突延伸障碍可能是睡眠剥夺后认知障碍发生的潜在机制之一。
二、72h睡眠剥夺对大鼠循环免疫细胞的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、72h睡眠剥夺对大鼠循环免疫细胞的影响（论文提纲范文）
（1）右美托咪定对术后睡眠剥夺大鼠心肌细胞焦亡的作用及其机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 睡眠剥夺对心血管系统的影响 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（2）睡眠剥夺对哺乳动物消化系统的影响（论文提纲范文）
| 1 睡眠剥夺对胃的影响 |
| 1.1 睡眠剥夺对胃动力的影响 |
| 1.1.1 胃排空功能 |
| 1.1.2 胃动力相关激素水平 |
| 1.1.3 胃电活动 |
| 1.1.4 胃运动神经中枢 |
| 1.2 睡眠剥夺对胃黏膜的影响 |
| 1.2.1 胃黏膜血流量及相关胃肠激素 |
| 1.2.2 胃酸水平 |
| 1.2.3 胃黏膜损伤 |
| 2 睡眠剥夺对肠道的影响 |
| 2.1 引起细菌向肠组织移位及肠道菌群紊乱 |
| 2.2 引起消化道黏膜免疫功能的损害 |
| 2.3 引起以DNA为主要目标的细胞损伤 |
| 2.4 引起结肠炎加重及恢复困难 |
| 3 睡眠剥夺对肝脏功能的影响 |
| 3.1 破坏肝脏组织结构 |
| 3.2 对肝脏相关酶和细胞因子的影响 |
| 3.2.1 谷丙转氨酶与谷草转氨酶 |
| 3.2.2 超氧化物歧化酶与丙二醛 |
| 3.3.3 细胞因子 |
| 4 睡眠剥夺对胰腺的影响 |
| 4.1 改变胰腺组织形态 |
| 4.2 对相关酶、激素和细胞因子的影响 |
| 5 睡眠剥夺影响机体的机制 |
| 5.1 睡眠剥夺诱发氧化应激 |
| 5.2 睡眠剥夺对细胞因子的影响 |
| 5.3 睡眠剥夺对激素分泌的影响 |
| 6 小 结 |
（3）睡眠剥夺对老龄大鼠术后认知功能及海马NLRP3-caspase-1信号通路的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词简表 |
| 第1章 引言 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 主要药品、试剂、仪器 |
| 2.1.1 药品试剂 |
| 2.1.2 主要仪器和设备 |
| 2.1.3 主要实验试剂的配制 |
| 2.2 实验方法和步骤 |
| 2.2.1 实验动物 |
| 2.2.2 实验动物分组及处理 |
| 2.2.3 睡眠剥夺模型制备 |
| 2.2.4 实验动物剖腹探查手术模型制备 |
| 2.2.5 Morris水迷宫实验 |
| 2.2.6 标本采集 |
| 2.2.7 脑组织切片制作及HE染色 |
| 2.2.8 实时荧光定量PRC实验测m RNA表达 |
| 2.2.9 大鼠海马组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)测定 |
| 2.2.10 Western Blot检测大鼠海马组织中NLRP3、Caspase-1 |
| 2.3 统计学分析 |
| 第3章 实验结果 |
| 3.1 睡眠剥夺对认知功能的影响 |
| 3.2 睡眠剥夺对老龄大鼠海马神经元形态学变化的影响 |
| 3.3 睡眠剥夺对大鼠海马组织NLRP3、Caspase-1 蛋白的影响 |
| 3.4 各组大鼠海马区IL-1β和 IL-18 蛋白及m RNA表达量的影响 |
| 3.5 睡眠剥夺对大鼠海马氧化应激水平的影响 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 结论与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 |
| 综述 睡眠碎片化对术后认知功能影响的研究进展 |
| 参考文献 |
（4）PINK1/Parkin自噬信号通路在丙泊酚减轻睡眠剥夺诱发的大鼠海马神经元损伤中的作用（论文提纲范文）
| 个人简历 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一部分 丙泊酚辅助睡眠对睡眠剥夺后大鼠血清睡眠相关炎症因子和认知功能的影响 |
| 前言 |
| 1 实验材料及仪器 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 丙泊酚辅助睡眠对睡眠剥夺后大鼠海马神经元线粒体的影响 |
| 前言 |
| 1 实验材料及仪器 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 PINK1/Parkin自噬信号通路在丙泊酚辅助睡眠减轻睡眠剥夺诱发的大鼠海马神经元线粒体损伤中的作用 |
| 前言 |
| 1 实验材料及仪器 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 小结 |
| 附录 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
（5）PPARγ途径改善妊娠期间睡眠剥夺子代认知功能的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.1.1 睡眠问题与健康状况 |
| 1.1.2 母亲睡眠剥夺与子代健康 |
| 1.1.3 产前应激与子代损伤 |
| 1.1.4 小胶质细胞与神经发育 |
| 1.1.5 PPARγ途径与小胶质细胞激活 |
| 1.2 研究的价值和意义 |
| 1.3 本文技术路线 |
| 第二章 妊娠期间母亲睡眠剥夺对子代和母亲行为的影响 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料与方法 |
| 2.2.1 实验动物 |
| 2.2.2 实验设备 |
| 2.2.3 孕鼠睡眠剥夺 |
| 2.2.4 Morris 水迷宫实验 |
| 2.2.5 子代生理参数测定 |
| 2.2.6 母亲照顾行为检测 |
| 2.2.7 数据处理方法 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 妊娠期间母亲睡眠剥夺对子代认知功能的影响 |
| 2.3.2 妊娠期间母亲睡眠剥夺对子代生理参数的影响 |
| 2.3.3 妊娠期间母亲睡眠剥夺对母亲照顾行为的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 MSD子代海马区PPARγ与认知功能的关系 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.2.1 实验动物 |
| 3.2.2 实验设备 |
| 3.2.3 试剂及来源 |
| 3.2.4 孕鼠睡眠剥夺 |
| 3.2.5 动物给药 |
| 3.2.6 Morris水迷宫 |
| 3.2.7 实时定量PCR |
| 3.2.8 Western blot |
| 3.2.9 数据处理方法 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 母亲睡眠剥夺对子代PPARγ表达的影响 |
| 3.3.2 PPARγ干预对母亲睡眠剥夺子代认知功能的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 PPARγ激活对妊娠期间睡眠剥夺子代小胶质细胞的影响 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料与方法 |
| 4.2.1 实验动物 |
| 4.2.2 实验设备 |
| 4.2.3 试剂及来源 |
| 4.2.4 孕鼠睡眠剥夺 |
| 4.2.5 动物给药 |
| 4.2.6 实时定量PCR |
| 4.2.7 免疫荧光染色 |
| 4.2.8 原代小胶质细胞培养 |
| 4.2.9 数据处理方法 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 PPARγ激活对MSD子代小胶质细胞数量和形态的影响 |
| 4.3.2 PPARγ激活对MSD子代小胶质细胞表型相关炎症因子水平的影响 |
| 4.3.3 PPARγ激活对原代培养的小胶质细胞极化状态的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 PPARγ激活对妊娠期间睡眠剥夺子代神经发生的影响 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验材料与方法 |
| 5.2.1 实验动物 |
| 5.2.2 实验设备 |
| 5.2.3 试剂及来源 |
| 5.2.4 孕鼠睡眠剥夺 |
| 5.2.5 动物给药 |
| 5.2.6 Morris 水迷宫实验 |
| 5.2.7 免疫荧光染色 |
| 5.2.8 神经元前体细胞(NPC)培养 |
| 5.2.9 数据处理方法 |
| 5.3 实验结果 |
| 5.3.1 PPARγ激活对MSD子代神经发生的影响 |
| 5.3.2 神经发生对MSD子代认知功能的影响 |
| 5.3.3 PPARγ介导的小胶质细胞极化状态对神经发生的影响 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 本章小结 |
| 第六章 全文总结与展望 |
| 6.1 全文总结 |
| 6.2 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间取得的成果 |
（6）视交叉上核Egr基因振荡紊乱在围术期痛觉过敏中的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 论文创新点 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 引言 |
| 第一部分 七氟醚吸入麻醉对急性 REM 睡眠剥夺大鼠痛觉过敏的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 视交叉上核 Egr 基因信号通路在围术期痛觉过敏中的作用 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 总结 |
| 参考文献 |
| 综述一 |
| 参考文献 |
| 综述二 |
| 参考文献 |
| 博士期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（7）睡眠剥夺对大鼠脾脏淋巴细胞生物钟基因表达水平的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 睡眠剥夺动物模型构建 |
| 1.3 标本采集 |
| 1.4 RT-PCR |
| 1.5 Western印迹检测 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 睡眠剥夺对大鼠脾淋巴细胞中生物钟基因mRNA表达水平的影响 |
| 2.2 睡眠剥夺后大鼠脾淋巴细胞生物钟基因mRNA相对表达量的变化 |
| 2.3 睡眠剥夺对大鼠脾淋巴细胞中生物钟蛋白表达水平的影响 |
| 2.4 睡眠剥夺后大鼠脾淋巴细胞生物钟蛋白相对表达量的变化 |
| 3 讨论 |
（8）基于线粒体生物合成探讨中枢疲劳的中医证候及生物学机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词对照 |
| 文献综述 |
| 综述一 中枢疲劳的研究进展 |
| 1 疲劳的定义 |
| 2 中枢疲劳的定义 |
| 3 中枢疲劳的机制 |
| 3.1 压力系统反应机制 |
| 3.2 神经递质和受体调控作用失常 |
| 3.3 中枢神经系统能量代谢 |
| 4 中枢疲劳治疗现状 |
| 5 中枢疲劳的动物模型 |
| 6 结语 |
| 参考文献 |
| 综述二 线粒体生物合成机制的研究进展 |
| 1. 线粒体生物合成概述 |
| 2. 线粒体生物合成的核心调控因子 |
| 2.1 沉默信息调节蛋白1 (SIRT1) |
| 2.2 过氧化物酶增殖激活受体辅助激活物-1α (PGC1-α) |
| 2.3 核呼吸因子-1/2 (NRF1/2) |
| 3. 线粒体生物合成与机体状态的机制相关性 |
| 4. 结语 |
| 参考文献 |
| 综述三 水环境小平台造模方法建立中枢疲劳肝郁脾虚证的研究现状 |
| 1. 初始应用领域——睡眠剥夺 |
| 2. 中医证候造模研究应用 |
| 3. 其他应用领域 |
| 3.1 认知功能下降 |
| 3.2 不良情绪 |
| 3.3 免疫功能下降 |
| 3.4 中枢疲劳 |
| 4. 讨论 |
| 4.1 MMPM用于造模时自身存在的问题 |
| 4.2 合理拓展MMPM应用领域 |
| 4.3 MMPM建立中枢疲劳肝郁脾虚证候的展望 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 理论研究 |
| 理论研究一 中枢疲劳的中医理论研究 |
| 1. 中枢疲劳的中医理论内涵 |
| 1.1 中枢疲劳的现代医学概念特点及中医理论范畴 |
| 1.2 古代文献中枢疲劳相关名词术语的解释 |
| 1.3 古代文献中中枢疲劳相关核心字的表述及含义分析 |
| 1.4 中枢疲劳的中医理论概念内涵总结 |
| 2. 古代文献中"神劳"和"志倦”的症状特点 |
| 2.1 "神劳”的相关文献记载 |
| 2.2 "志倦"的相关文献记载 |
| 2.3 "神劳"的病因和症状总结 |
| 3 中枢疲劳的症状与病机相关性分析 |
| 3.1 阴阳与中枢疲劳的病机相关性 |
| 3.2 五脏与中枢疲劳的病机相关性 |
| 4 以症聚证,探讨中枢疲劳中医证候特点 |
| 5. 结论 |
| 理论研究二 基于线粒体生物合成机制探讨中枢疲劳和肝郁脾虚证相关性的理论研究 |
| 1. 现代文献检索方法和结果 |
| 2. 中枢疲劳发病机制和肝郁脾虚证生物学基础的相关性探讨 |
| 2.1 肝郁脾虚证的诊断依据 |
| 2.2 肝郁脾虚证的生物学基础和中枢疲劳的发病及延伸机制密切相关 |
| 3. 中枢疲劳肝郁脾虚证的生物学机制和线粒体功能相关性 |
| 3.1 肝郁证和线粒体功能机制相关性 |
| 3.2 脾虚证和线粒体功能机制相关性 |
| 4. 从线粒体生物合成讨论中枢疲劳肝郁脾虚证的科学内涵 |
| 5. 结论 |
| 理论研究三 从肝脾论治中枢疲劳的理论研究 |
| 1. 疏木扶土——从肝脾论治中枢疲劳 |
| 1.1 中枢疲劳从肝论治的理论依据 |
| 1.2 中枢疲劳从脾论治的理论依据 |
| 2. 疏肝健脾——调控细胞内能量代谢和信息传导平衡 |
| 3. 体复康加减方干预中枢疲劳的文献和理论依据 |
| 3.1 君药 |
| 3.2 臣药 |
| 3.3 佐药 |
| 3.4 使药 |
| 4. 结论 |
| 理论研究小结 |
| 实验研究 |
| 实验研究一 中枢疲劳大鼠模型的探索与评价 |
| 1. 材料和方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 实验仪器设备和试剂 |
| 1.3 实验方法及步骤 |
| 2. 实验结果 |
| 2.1 大鼠一般状态观察 |
| 2.2 旷场实验指标变化 |
| 2.3 高架十字迷宫指标变化 |
| 2.4 负重力竭游泳指标变化 |
| 2.5 海马CA1区线粒体超微结构变化 |
| 3. 讨论 |
| 实验研究二 体复康加减方干预中枢疲劳肝郁脾虚证候模型的药效和评价 |
| 1. 材料和方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 实验仪器设备和试剂 |
| 1.3 实验方法及步骤 |
| 2. 实验结果 |
| 2.1 体重及一般情况变化 |
| 2.2 旷场实验指标变化 |
| 2.3 高架十字迷宫指标变化 |
| 2.4 负重力竭游泳指标变化 |
| 3. 讨论 |
| 实验研究三 体复康加减方干预中枢疲劳模型大鼠能量代谢和氧化作用的机制研究 |
| 1. 材料和方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 实验仪器设备和试剂 |
| 1.3 实验方法及步骤 |
| 2. 实验结果 |
| 2.1 血清生化指标 |
| 2.2 肝脏MDA和SOD |
| 3. 讨论 |
| 实验研究四 体复康加减方对中枢疲劳大鼠模型海马线粒体形态及mtDNA拷贝量的改善作用研究 |
| 1. 材料和方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 实验仪器设备和试剂 |
| 1.3 实验方法及步骤 |
| 2. 实验结果 |
| 2.1 海马CA1区线粒体超微结构变化 |
| 2.2 海马mtDNA拷贝量变化 |
| 3. 讨论 |
| 实验研究五 体复康加减方对中枢疲劳大鼠模型海马SIRT1-PGC-1α-NRF1通路的调控作用 |
| 1. 材料和方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 实验仪器设备和试剂 |
| 1.3 实验方法及步骤 |
| 2. 实验结果 |
| 2.1 SIRT1、PGC-1α、NRF1免疫组化阳性物的表达变化 |
| 2.2 SIRT1、PGC-1α、NRF1蛋白表达变化 |
| 2.3 SIRT1、PGC-1α、NRF1基因表达变化 |
| 3. 讨论 |
| 实验研究小结 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 参考书目 |
| 附录 |
| 1. 体复康加减方浸膏样品HPLC分析图谱 |
| 1.1 不同方法制备的供试品HPLC横向重叠图谱 |
| 1.2 最适分离条件HPLC色谱图(30%乙醇超声) |
| 2 免疫组化照片(放大倍数40×) |
| 2.1 各组大鼠海马SIRT1免疫组化阳性物表达照片 |
| 2.2 各组大鼠海马PGC-1α免疫组化阳性物表达照片 |
| 2.3 各组大鼠海马NRF1免疫组化阳性物表达照片 |
| 3. RT-PCR各指标扩增和溶解曲线 |
| 3.1 β-actin扩增和溶解曲线 |
| 3.2 cytochrome b扩增和溶解曲线 |
| 3.3 SIRT1扩增和溶解曲线 |
| 3.4 PGC-1α扩增和溶解曲线 |
| 3.5 NRF1扩增和溶解曲线 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简历 |
（9）硫化氢抑制神经炎症拮抗睡眠剥夺所致大鼠抑郁和焦虑行为（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 材料与方法 |
| 第三章 结果 |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
四、72h睡眠剥夺对大鼠循环免疫细胞的影响（论文参考文献）
- [1]右美托咪定对术后睡眠剥夺大鼠心肌细胞焦亡的作用及其机制研究[D]. 张赛. 河北北方学院, 2021(01)
- [2]睡眠剥夺对哺乳动物消化系统的影响[J]. 贾丽妍,王钰雯,黄佳琦,陈耀星,王铁,曹静,董玉兰,王子旭. 中国畜牧兽医, 2021(04)
- [3]睡眠剥夺对老龄大鼠术后认知功能及海马NLRP3-caspase-1信号通路的影响[D]. 詹芬芳. 南昌大学, 2021(01)
- [4]PINK1/Parkin自噬信号通路在丙泊酚减轻睡眠剥夺诱发的大鼠海马神经元损伤中的作用[D]. 肖永. 广西医科大学, 2019(08)
- [5]PPARγ途径改善妊娠期间睡眠剥夺子代认知功能的机制研究[D]. 王久太. 电子科技大学, 2019(01)
- [6]视交叉上核Egr基因振荡紊乱在围术期痛觉过敏中的作用及机制研究[D]. 沈倩妮. 武汉大学, 2019(01)
- [7]睡眠剥夺对大鼠脾脏淋巴细胞生物钟基因表达水平的影响[J]. 邢陈,顾晔,徐秀段,邹书仙,胡永亮,胡美茹,宋伦. 军事医学, 2017(11)
- [8]基于线粒体生物合成探讨中枢疲劳的中医证候及生物学机制[D]. 韩晨霞. 北京中医药大学, 2017(08)
- [9]硫化氢抑制神经炎症拮抗睡眠剥夺所致大鼠抑郁和焦虑行为[D]. 兰芳. 南华大学, 2016(03)
- [10]细胞型朊蛋白介导的海马神经元轴突延伸障碍可能参与睡眠剥夺后认知障碍[J]. 窦伟,李振,张照环,黄流清,赵忠新. 中华神经科杂志, 2015(01)