一、转化生长因子βⅡ型受体与大肠癌（论文文献综述）
胡滢[1]（2021）在《结直肠癌微环境乳酸与巨噬细胞炎症小体的相关机制研究》文中研究说明研究背景与目的结直肠癌（Colorectal cancer,CRC）是消化系统最常见的恶性肿瘤之一,它与肿瘤微环境的关系尚未研究全面。乳酸,有氧糖酵解的代谢产物,它贯穿于肿瘤发展的整个过程。结直肠癌产生的乳酸、分泌的转化生长因子β（TGF-β）与肿瘤微环境的炎症小体等物质形成复杂的网络,从而调控其发展过程。本课题通过研究结直肠癌来源的乳酸诱导THP-1来源巨噬细胞中炎症小体激活与抑制的机制,探讨乳酸使机体实现免疫监视的同时逃避免疫监视的机制。本研究将为临床研发新的结直肠癌靶向药物带来新的思路。研究方法1 THP-1细胞予佛波酯（PMA）诱导后,暴露于乳酸、细菌等炎症小体激活刺激物。2 结直肠癌来源的乳酸刺激THP-1衍生的巨噬细胞中炎症小体的激活（1）使用含/不含葡萄糖培养基培养结直肠癌细胞HCT116,收集上清刺激THP-1衍生巨噬细胞;（2）予乳酸、丙酮酸、丝氨酸刺激巨噬细胞,蛋白质免疫印迹法（Western Blot,WB）检测 Caspase-1、IL-1β 的活化;（3）予乳酸、MSU处理稳转ASC-GFP的巨噬细胞,对ASC-GFP点定量分析;（4）NLRP3 siRNA转染巨噬细胞,予乳酸处理,WB检测Caspase-1、IL-1β的表达,RT-PCR检测NLRP3 mRNA水平;（5）用乳酸处理巨噬细胞,流式细胞仪检测ROS水平;予ROS清除剂N-乙酰基-L-半胱氨酸NAC预处理巨噬细胞,再用乳酸处理,WB检测Caspase-1、IL-1β的表达。3 乳酸通过刺激TGF-β信号通路抑制THP-1衍生的巨噬细胞中炎症小体的激活（1）TGF-β预处理巨噬细胞,再用乳酸、经典配体刺激炎症小体活化,检测Caspase-1、IL-1β的表达;对ASC-GFP点定量分析;（2）TGF-β预处理后对细菌、MSU、ATP诱导炎症小体激活的影响,对ASC-GFP点定量分析;（3）TGF-β不同时间预处理对细菌诱导炎症小体激活的影响,予TGF-β Ⅰ型受体抑制剂SB431542干预,检测Caspase-1、IL-1β的活化;（4）SMAD2 siRNA转染THP-1衍生巨噬细胞,先予TGF-β预处理,再予乳酸处理,检测Caspase-1、IL-1β的活化;TGF-β对ASC-GFP聚集的作用。4 TGF-β通过SMAD-自噬-ROS信号转导途径抑制炎症小体激活（1）TGF-β预处理巨噬细胞,再进行乳酸处理,WB检测Caspase-1、LC3表达;流式细胞仪检测ROS水平;（2）用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤干预已予TGF-β、乳酸处理的巨噬细胞,WB 检测 Caspase-1、IL-1β 和 LC3 表达。结果1 乳酸可作为DAMP刺激THP-1衍生的巨噬细胞中炎症小体的活化,也可诱导巨噬细胞NLRP3炎症小体活化。2 乳酸通过上调ROS来激活THP-1衍生的巨噬细胞炎症小体。3 乳酸通过刺激TGF-β来抑制THP-1衍生的巨噬细胞中炎症小体的激活。（1）乳酸可诱导结直肠癌细胞中TGF-β的表达和分泌;（2）TGF-β可抑制乳酸或经典配体诱导的炎症小体激活;（3）TGF-β通过TGF-β R1来抑制炎症小体的活化。4 TGF-β通过SMAD-自噬-ROS信号转导途径抑制炎症小体激活。（1）TGF-β处理减弱了乳酸诱导的ROS累积;（2）随着TGF-β处理时间延长,自噬越明显。结论结直肠癌细胞来源的乳酸可刺激THP-1衍生巨噬细胞中炎症小体的激活,也诱导结直肠癌细胞分泌TGF-β,而TGF-β通过SMAD-自噬-ROS通路抑制炎症小体的激活,从而逃避免疫监视。
王文龙[2]（2020）在《基于上皮间质转化探讨复方苦参注射液防治放射性肺损伤的机制》文中提出目的:放射性肺损伤是胸部肿瘤放疗最常见的并发症,既往关于其发生机制的研究主要集中在氧自由基及炎性细胞因子的产生和效应,而放射性肺损伤后发生上皮间质转化（EMT）的现象及其机理并未引起足够的重视。近期有多项研究表明,复方苦参注射液对上皮间质转化有一定的抑制作用。本项目拟通过建立小鼠放射性肺损伤疾病模型,以不同浓度复方苦参注射液进行干预,而后评估小鼠肺损伤程度,测定EMT相关的表型标记物、细胞因子等变化,以及EMT相关信使mRNA转录水平变化及由此导致TGF-β1/Smads、Wnt/β-catenin信号通路交互变化。本项目拟通过观察复方苦参注射液对放射性肺损伤小鼠上皮间质转化效应途径的影响,有望阐明复方苦参注射液通过抑制上皮间质转化而防治放射性肺损伤的机理,为临床推广使用复方苦参注射液防治放射性肺损伤提供实验依据。方法:1.理论部分:通过回顾性分析了中医学对放射性肺损伤的认识,探究了热毒络瘀相关理论的源流及其典型代表中成药复方苦参注射液。2.实验部分:C57bl/6小鼠194只,雄性,依据随机数字表法分为10组:空白对照组（Control group,Control）、模型组（Model group,Model）、复方苦参注射液低剂量组（Compound kushen injection-Low dose group,CKI-L）、复方苦参注射液中剂量组（Compound kushen injection-Middle dose group,CKI-M）、复方苦参注射液高剂量组（Compound kushen injection-High dose group,CKI-H）、信号通路激动剂1组（SB431542,SB）、信号通路抑制剂2组（XAV-939,XAV）、复方苦参注射液+信号通路抑制剂1组（CKI+SB）、复方苦参注射液+信号通路抑制剂2组（CKI+XAV）、地塞米松注射液组（Dexamethason,DXM）。使用美国XStrahl小动物精准放疗辐照研究平台（SARRP）,实施单次20 Gy双侧肺野照射成功建立C57bl/6小鼠放射性肺损伤模型。照射后观察小鼠的一般情况,分别于照射后第2、4、6、8、10、12周6个时间点处死小鼠,采集血清和取出肺组织。取第4、8周C57bl/6小鼠肺组织,小鼠及肺组织称重,计算肺系数,采用苏木精伊红染色法（HE）和Masson染色,分别通过光学显微镜和电子显微镜观察各组C57bl/6小鼠肺组织病理学形态改变;采用免疫组织化学染色法（IHC）检测C57bl/6小鼠在第4周、第8周的肺组织中E-cadherin、Vimentin蛋白表达情况;采用酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测C57bl/6小鼠在第第4周、第8周采集血浆中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和转化生长因子β1（TGF-β1）含量;采用实时定量PCR法（RT-qPCR）检测各组小鼠第4周、第8周肺组织中TGF-β1mRNA、Smad3 mRNA、GSK-3βmRNA、β-catenin mRNA的表达水平;采用免疫印迹法（Western-blot）分别检测各组小鼠在第4周、第8周肺组织内TGF-β1、Smad3、GSK-3β、β-catenin通道蛋白表达水平。结果:1.实验一结果复方苦参注射液可增加放射性肺损伤小鼠肺系数,减轻小鼠放射性肺损伤病理损害程度,并可改善小鼠一般情况,包括毛色、脱毛、食量、活动及体重等。2.实验二结果2.1 HE染色结果:Control组:小鼠肺组织肺泡壁较薄,肺泡结构清晰,毛细血管完整,无充血及水肿,无炎症细胞浸润,各时间点均未见明显病理改变;Model组:照射后前2周以渗出性病变为主,肺泡腔可见少量炎症细胞浸润,出现急性肺间质水肿、充血,第4周可见肺组织间质明显水肿及支气管周围炎性细胞浸润,肺泡结构破坏,部分肺泡萎缩,第6周炎性细胞浸润减少,小鼠肺组织间质水肿渐渐消退,肺泡隔渐增宽,肺泡腔有所缩小,出现成纤维细胞,胶原增生,第8周小鼠炎性细胞减退,肺组织间质水肿进一步消退,肺泡间隔增宽,肺泡结构破坏,出现部分肺泡塌陷伴有不张,还可见少许梭形成纤维细胞,第12周小鼠肺泡扩张加重,胶原增生明显,气体交换空间显着减少,肺泡塌陷更明显、并纤维化;CKI-L组、CKI-M组及CKI-H组:第2周渗出性病变较轻,肺间质水肿、充血及炎性细胞浸润程度等均较Model明显减轻;第4周,可见少许炎性细胞浸润,肺组织间质轻度水肿;第8周可见炎性渗出,肺泡壁毛细血管轻度充血,肺间质轻度水肿,肺泡部分塌陷,肺泡壁略有增厚,但是上述表现均较Model组明显减轻;第12周可见少许成纤维细胞,肺泡壁轻度增厚,部分肺纤维化,但均明显较Model组显着减轻;DXM组各时间点与CKI-H组无明显差别;SB组和XAV组各时间点处于CKI-M组及CKI-H组之间,但未见明显差别;CKI+SB组和CKI+XAV组第2周、第4周渗出性病变较轻微,肺间质水肿、充血及炎性细胞浸润程度等均较单药干预组明显减轻;第8周可见少许炎性渗出,肺泡壁毛细血管轻度充血,肺间质轻度水肿,肺泡部分塌陷,肺泡壁略有增厚,但是上述表现均较单药干预组明显减轻;第12周可见少许成纤维细胞,肺泡壁轻度增厚,部分肺纤维化,但均明显较单药干预组显着减轻。2.2 Masson染色结果:胶原纤维呈蓝色,肌纤维呈红色,细胞核呈现蓝黑色。Control组:胶原纤维较少,肌纤维多,细胞核多;Model组:随着造模时间的延长,胶原纤维逐渐增多,可见大量胶原纤维;与Model组比较,复方苦参注射液各浓度组的胶原纤维染色受到较为明显的抑制;SB组、XAV-939组胶原纤维染色也受到较为明显的抑制,胶原纤维量较模型组明显减少,与CKI-M组和CKI-H组相仿;SB组、XAV组,各时间点胶原纤维量较Model组明显减少,与单药干预组相比,胶原纤维染色受到更为明显的抑制。放射性肺炎和放射性肺纤维化常常同时发生,随着时间进一步延长,放射性肺炎逐步减轻和放射性肺纤维化程度渐渐加重,本研究4周内以放射性肺炎为主,4周到8周出现放射性肺炎渐减轻和放射性肺纤维化程度渐加重,12周以放射性肺纤维化为主,经过复方苦参注射液及信号通路抑制剂单药或联合干预后,放射性肺炎及放射性肺纤维化程度受到明显的抑制,CKI-M组和CKI-H组干预效果优于CKI-L组,与信号通路抑制剂组相当,逊于CKI+SB组、CKI+XAV组。2.3透射电镜结果:Control组:细胞核大,呈现椭圆形,未见胶原纤维,结构完整,肺泡腔相对干净,肺泡间隔未增宽增厚,肺泡上皮细胞表面绒毛球形,高尔基体数量较多,偶见巨噬细胞和红细胞;Model组:细胞核固缩,变小,可见大量胶原纤维,可见条索样改变,肺泡上皮细胞线粒体肿胀明显,其内部活性物质增多较多,胞浆减少,空泡较为严重,巨细细胞增多,伴有纤维细胞产生;复方苦参注射液各浓度组:各时间点细胞核大小介于Control组和Model组之间,胶原纤维数目中等,肺泡上皮细胞线粒体肿胀较轻,处于慢性炎症修复阶段。SB组及XAV组:各时间点细胞核大小介于Control组和Model组之间,胶原纤维数目与CKI-H组及CKI-H组相当。CKI+SB组、CKI+XAV组两联合用药组:各时间点细胞核大小介于Control组和Model组之间,胶原纤维数目较单药干预组明显减少,肺泡上皮细胞线粒体肿胀也较单药干预组明显减轻,处于慢性炎症修复阶段。3.实验三结果3.1各组小鼠肺组织中E-cadheren蛋白表达情况:E-cadheren蛋白主要表达定位于细胞膜、细胞浆液和细胞连接等。免疫组化结果显示:E-cadheren蛋白在肺组织细胞浆和胞膜上表现为棕黄色或棕褐色或淡黄色颗粒。Control组小鼠肺组织中的E-cadheren表达率较高;Model小鼠肺组织中的E-cadheren表达率很低;复方苦参注射液各剂量组C57bl/6小鼠肺组织各时间点的E-cadheren表达率介于Control组和Model组之间,E-cadheren表达率处于中等;SB组及XAV组小鼠肺组织各时间点的E-cadheren表达率也同样介于Control组和Model组之间,E-cadheren表达率与CKI-M组及CKI-H组相当;CKI+SB组、CKI+XAV组两联合用药组小鼠肺组织各时间点的E-cadheren表达率虽然介于Control组和Model组之间,但E-cadheren表达率较单药干预组明显增加,更接近于Control组。3.2各组小鼠肺组织中Vimentin蛋白表达情况:Vimentin蛋白主要表达在定位于细胞浆,常附在细胞核、内质网及线粒体的旁边或末端。免疫组化结果显示:Vimentin蛋白在肺组织细胞浆上表现为棕黄色或棕褐色或淡黄色颗粒。Control小鼠肺组织中的Vimentin表达率很低;Model组小鼠肺组织中的Vimentin表达率较高;复方苦参注射液各剂量组小鼠肺组织各时间点的Vimentin表达率介于Control组和Model组之间,Vimentin表达率处于中等;SB组及XAV组小鼠肺组织各时间点的Vimentin表达率也同样介于Control组和Model组之间,Vimentin表达率与CKI-M组、CKI-H相当;CKI+SB组、CKI+XAV组小鼠肺组织各时间点的Vimentin表达率虽然介于Control组和Model组之间,但Vimentin表达率较单药干预组明显减少。4.实验四结果与Control组比较,Model组小鼠血清TGF-β1、TNF-α含量在第4、8周均显着性升高（P<0.01）;与Model组比较,除CKI-L组第8周外,CKI-M组、CKI-H组及其他用药干预组小鼠血清TGF-β1、TNF-α含量在第4、8周均显着性降低（P<0.05,P<0.01）;与CKI-M组比较,CKI+SB组小鼠血清TGF-β1、TNF-α含量在第8周均显着性降低（P<0.05,P<0.01）,CKI+SB组、CKI+XAV组小鼠血清TNF-α含量在第4周均显着性降低（P<0.05）,CKI-L组小鼠血清TGF-β1、TNF-α含量在第4周显着性升高（P<0.05）,其余各用药干预组小鼠血清TGF-β1、TNF-α含量在第4、8周均未见显着性差异（P>0.05）;与CKI-H组比较,CKI-L组小鼠血清TGF-β1、TNF-α含量在第4周均显着性升高（P<0.05,P<0.01）,CKI-L组小鼠血清TGF-β1含量在第8周均显着性升高（P<0.05,P<0.01）,CKI+SB组小鼠血清TGF-β1含量在第4周显着性降低（P<0.05,P<0.01）,CKI+SB组小鼠血清TNF-α含量在第8周显着性降低（P<0.05）,其余各用药干预组小鼠血清TGF-β1含量在第4、8周均未见显着性差异（△P>0.05）;与DXM组比较,CKI-L组小鼠血清TGF-β1、TNF-α含量在第4周均显着性升高（P<0.05,P<0.01）,CKI-L组小鼠血清TGF-β1含量在第8周均显着性升高（P<0.05,P<0.01）,CKI+SB组小鼠血清TGF-β1含量在第4周显着性降低（P<0.05）,其余各用药干预组小鼠血清TGF-β1含量在第4、8周均未见显着性差异（P>0.05）。5.实验五结果5.1 Real time RT-PCR实验结果:与Control组比较,Model组第4周、第8周的TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3βm RNA表达水平明显升高（P<0.01）;与Model组比较,CKI-L组、CKI-M组、CKI-H组、DXM组、CKI+SB组、CKI+XAV组第4周、第8周的TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3βm RNA表达水平均有不同程度降低（P<0.01,P<0.05）;与CKI-H组比较,DXM组、SB组、XAV组第4周、第8周的TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3βm RNA表达水平变化改变不明显（P>0.05）,CKI-L组、CKI-M组第8周的TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3βm RNA表达水平变化改变不明显（P>0.05）,而CKI+SB组、CKI+XAV组第4周、第8周的TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3βm RNA表达水平改变明显,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）;而CKI-L组、CKI-M组第4周、第8周的TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3βm RNA表达水平改变明显,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）;与DXM组比较,CKI-H组、SB组、XAV组第4周、第8周的TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3βm RNA表达水平变化不明显（P>0.05）,CKI+SB组、CKI+XAV组第4周、第8周的TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3βm RNA表达水平改变明显,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）,而CKI-L组、CKI-M组第四周TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3βm RNA表达水平变化不明显（P>0.05）。5.2 Western t bolt实验结果:与Control组比较,Model组第4周、第8周的TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3β蛋白表达水平明显升高（P<0.01）;与Model组比较,CKI-H组、DXM组、CKI+SB组、CKI+XAV组第4周、第8周的TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3β蛋白表达水平均有不同程度降低（P<0.01,P<0.05）,而CKI-L组和CKI-M组TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3β蛋白表达水平变化改变不明显（P>0.05）;与CKI-H组比较,CKI-L组、CKI-M组、DXM组、SB组、XAV组第4周、第8周的TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3β蛋白表达水平变化改变不明显（P>0.05）,而CKI+SB组、CKI+XAV组第4周、第8周的TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3β蛋白表达水平改变明显,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）;与DXM组比较,CKI-L组、CKI-M组、CKI-H组、SB组、XAV组第4周、第8周的TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3β蛋白表达水平变化不明显（P>0.05）,CKI+SB组、CKI+XAV组第4周、第8周的TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3β蛋白表达水平改变明显,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。5.3免疫荧光实验结果:TGF-β1蛋白主要表达在细胞间质。Smad3蛋白主要表达在定位于细胞核及细胞浆。GSK-3β蛋白主要表达在定位于细胞核、细胞浆及细胞膜。β-catenin蛋白主要表达在定位于细胞核、细胞浆及细胞膜。TGF-β1蛋白免疫荧光结果显示:TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3β蛋白在肺组织细胞间质为深浅不同的红色颗粒。Control组C57bl/6小鼠肺组织中的TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3β表达率很低;Model组C57bl/6小鼠肺组织中的TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3β表达率较高;复方苦参注射液各剂量组C57bl/6小鼠肺组织各时间点的TGF-β1表达率介于Control组和Model组之间,TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3β表达率处于中等;信号通路抑制剂SB431542组及XAV-939组C57bl/6小鼠肺组织各时间点的TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3β表达率也同样介于Control组和Model组之间,TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3β表达率与CKI-M组和CKI-H组相当;复方苦参注射液+SB431542组、复方苦参注射液+XAV-939组两联合用药组C57bl/6小鼠肺组织各时间点的TGF-β1、Smad3、β-catenin、GSK-3β表达率虽然介于Control组和Model组之间,但TGF-β1表达率较单药干预组明显减少。结论:放射性肺损伤发病机制复杂,近年来放射性肺损伤后发生的上皮间质转化备受关注。为此,我们基于上皮间质转化及中医热毒络瘀理论,选择中成药复方苦参注射液来干预小鼠放射性肺损伤,并取得了较好的放射防护作用,其可能机制如下:1.复方苦参注射液可以通过降低血清中EMT相关的TNF-α和TGF-β1的水平,从而减轻C57bl/6小鼠放射性肺损伤;2.复方苦参注射液可以降低TGF-β/Smads和Wnt/β-catenin信号通路EMT相关基因的表达;3.复方苦参注射液还可通过降低TGF-β/Smads和Wnt/β-catenin信号通路EMT相关通道蛋白的表达来达到防治放射性肺损伤的目的。
李二云[3]（2019）在《基于TGF-β/Smads信号通路研究内异痛经灵治疗子宫内膜异位症的作用机理》文中进行了进一步梳理目的:通过自体移植的方法建立大鼠子宫内膜异位症（简称内异症,EMs）模型,观察中药内异痛经灵对内异症大鼠异位模型中TGF-β1、TβRⅠ、Smad2/3、Smad7蛋白表达的影响,为该方治疗EMs提供理论依据。方法:选择健康雌性未孕Spragne-Dawley（SD）大鼠作为研究对象,随机分为空白对照组（正常假手术组）、模型组、中药高剂量组（内异痛经灵高剂量组）、中药中剂量组（内异痛经灵中剂量组）、中药低剂量组（内异痛经灵低剂量组）和西药组（孕三烯酮组）6个组。空白组行假手术开关腹,中药高、中、低剂量组及西药组均制成子宫内膜异位症模型,造模后第四周,检测模型成功情况。造模后第5周起给药,空白组及模型组分别给予0.9%的生理盐水10ml/kg灌胃,一日一次;中药高、中、低剂量组分别给予3g/ml的内异痛经灵混悬液16.5ml/kg、8.28ml/kg、4.14ml/kg灌胃,一日一次;西药组给予0.05mg/ml的孕三烯酮溶解液10ml/kg灌胃,1周2次。给药4周后,测量异位病灶体积,提取大鼠异位病灶组织。采用HE染色法对内膜组织进行病理观察,免疫组化法、免疫印迹法检测大鼠异位病灶中TGF-β1、TβRⅠ、Smad2/3和Smad7的蛋白表达情况,探讨内异痛经灵的作用机理。结果:1.用药4周后,中药高、中、低剂量组及西药组异位内膜的体积较模型组明显减小,P<0.05,差异有统计学意义;中药各剂量组及西药组之间异位内膜体积比较无明显差异,P>0.05;2.光镜下观察发现,空白组大鼠子宫内膜腺上皮细胞排列整齐,完整,呈矮柱状,细胞核较小,间质细胞分布均匀,腺体数量多,腺腔完整,腺腔较大;模型组异位内膜组织中,腺上皮细胞排列欠规则,呈高柱状或立方体,细胞核明显增大,间质细胞丰富,排列密集,腺体细胞明显增多,大部分上皮细胞可见核下空泡,部分异位内膜组织形成内膜囊腔;用药后,各组异位内膜腺上皮细胞排列较规则,呈矮柱状或扁平状。与模型组相比,腺上皮细胞的细胞核减小,间质细胞数目减少,排列疏松,腺体数目减少,腺腔减小。以中药中剂量组及西药组表现最为明显,中药高剂量组次之,中药低剂量组效果欠佳。3.与模型组相比,中药各剂量组及西药组异位内膜组织中TGF-β1、TβRⅠ、Smad2/3蛋白表达量明显降低,差异均有统计学意义（P<0.05）,同时,中药各剂量组及西药组Smad7的蛋白表达量明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）。中药高、中剂量组及西药组间比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论:1.内异痛经灵可以明显减小EMs大鼠异位内膜体积,抑制其异位内膜生长,从而达到治疗内异症的目的;2.内异痛经灵可以通过减少EMs大鼠异位内膜组织中TGF-β1、TβRⅠ、smad2/3的蛋白表达,增加Smad7的蛋白表达,从而达到治疗内异症的目的;3.内异症的治疗可以通过调节TGF-β/Smads信号通路相关因子的表达来实现。
孙红梅,武金宝[4]（2019）在《上皮间质转化的相关生物标志物在大肠癌中的研究进展》文中研究说明大肠癌（Colorectal cancer,CRC）是世界上常见的恶性肿瘤,分为结肠癌和直肠癌,是多基因、多因素、多步骤的复杂的过程,是当下严重影响人类健康的恶性肿瘤之一。癌症统计结果显示,在恶性肿瘤发病率中结直肠癌居第3位,死亡率居第4位[1]。大肠癌的5年生存率仍然不是很高,50 %以下[2]。纵然近些年大肠癌的早期诊断方法有了提高和进步,可是因为大肠癌早期临床症状如排便习惯的改变与粪便性状的改变相对比较隐匿,得不到患者的充分重视,
吴双[5]（2016）在《激活素A在人大肠癌组织中的表达及其作用研究》文中认为大肠癌是临床上常见的恶性肿瘤之一,其发病率逐年上升。但目前对大肠癌的早期诊断及治疗效果依然不甚理想。临床上,急需更为有效的方法提高大肠癌的诊断效率及治疗效果,使大肠癌患者从中获益。激活素A具有多种生物学活性,包括参与多种肿瘤的发生、发展;尽管已有部分研究表明激活素A在大肠癌组织表达,但关于大肠癌患者血清激活素A水平、激活素A对大肠癌细胞作用的信号转导机制等仍未明确。因此,本研究检测了健康对照者、大肠良性息肉及大肠癌患者血清激活素A水平,结果发现大肠癌患者血清激活素A水平较健康对照者及大肠良性息肉患者血清激活素A水平明显升高,并且激活素A水平与大肠癌分期存在一定关联。RT-PCR、Western blotting及免疫组织化学染色等结果确认了激活素A是由大肠癌细胞分泌,提示激活素A可能成为辅助诊断大肠癌的新的肿瘤标记物。本研究又通过吉姆萨染色及流式细胞术等方法检测激活素A对大肠癌细胞系SW480细胞的作用,发现激活素A可以诱导SW480细胞凋亡。另外,本研究还通过基因敲低及过表达等方法证明激活素A通过Smads信号传导途径诱导SW480细胞凋亡。一、大肠癌患者血清及组织中激活素A水平变化1.健康对照者、大肠良性息肉患者及大肠癌患者血清激活素A水平应用ELISA试剂盒检测健康对照者、大肠良性息肉患者及大肠癌患者血清激活素A水平,结果发现:大肠癌患者血清激活素A水平较健康对照者及大肠良性息肉患者血清激活素A水平明显升高;大肠癌术后患者血清激活素A水平较术前明显下降,提示大肠癌患者血清激活素A来源于大肠癌组织。2.激活素A在大肠癌组织中的表达应用RT-PCR及Western blotting检测激活素A m RNA及蛋白在大肠癌组织中的表达。结果显示,大肠癌组织可高表达激活素A。免疫组织化学染色进一步表明大肠癌细胞高表达激活素A。3.血清激活素A水平与大肠癌分期的关系大肠癌患者血清激活素A水平与其分期相关,即I期大肠癌患者血清激活素A水平明显低于II期、III期大肠癌患者,提示血清激活素A水平与大肠癌的术前分期有关。4.血清激活素A与癌胚抗原的比较与常用的大肠癌肿瘤标记物癌胚抗原（CEA）相比,激活素A具有更高的特异性,故在临床上,联合应用CEA及血清激活素A可能提高大肠癌诊断的准确性。通过以上结果确认了激活素A在大肠癌患者血清及组织中的表达,并提示激活素A可能成为辅助诊断大肠癌的肿瘤标记物。二、激活素A诱导大肠癌细胞系SW480发生凋亡的作用1.激活素A在大肠癌细胞系SW480中的表达应用RT-PCR及Western blotting检测大肠癌细胞系SW480细胞激活素A表达,结果发现SW480细胞可表达激活素A。与前述实验结果相符。2.激活素A诱导SW480细胞凋亡实验采用MTT法测定细胞活力,结果提示:在外源性激活素A作用下,大肠癌细胞系SW480细胞活力减弱。应用吉姆萨染色检测激活素A对SW480细胞的作用。结果发现:SW480细胞发生核固缩、凋亡小体等。提示激活素A可诱导SW480大肠癌细胞发生凋亡。进一步应用流式细胞术检测激活素A对SW480的凋亡作用。结果显示:激活素A可诱导SW480大肠癌细胞发生凋亡,且呈时间及浓度依赖性。3.激活素受体及Smad3在SW480细胞中的表达Smads途径为经典的激活素A信号转导通路,本实应用RT-PCR及Western blotting检测了激活素A受体及Smad3在SW480细胞中的表达。结果发现:激活素A处理的SW480细胞Smads通路的关键蛋白Smad3及Act RIIA与Act RIIB均升高,且呈浓度依赖性。提示激活素A可能通过Smads信号传导途径诱导SW480大肠癌细胞凋亡。三、Smad3基因敲低减弱激活素A诱导的SW480细胞凋亡作用SW480细胞转染Smad3 sh RNA表达质粒敲低Smad3基因表达,再应用流式细胞术检测激活素A诱导SW480大肠癌细胞的凋亡作用。结果显示,Smad3基因敲低后激活素A诱导SW480细胞凋亡明显减少。该结果进一步表明Smad3信号介导了激活素A诱导SW480大肠癌细胞凋亡作用。四、Smad3基因过表达对激活素A诱导SW480细胞凋亡作用的增强SW480细胞转染Smad3表达质粒,再应用流式细胞术检测激活素A诱导SW480大肠癌细胞的凋亡作用。结果显示,Smad3基因过表达后激活素A诱导SW480细胞凋亡明显增加。该结果进一步确定Smad3信号介导了激活素A诱导SW480大肠癌细胞凋亡作用。结论:1.研究发现大肠癌患者血清激活素A水平升高,表明其可以作为大肠癌肿瘤标记物用于临床辅助诊断。2.研究表明激活素A用于大肠癌辅助诊断其特异性明显高于CEA,更具有早期临床样本筛查价值。3.研究证实激活素A可诱导大肠癌SW480细胞凋亡,其作用与Smads信号传导途径有关,提示激活素A也具有治疗大肠癌的潜能。
王付钦,乌新林[6]（2016）在《TGF-β在胃肠道肿瘤发生发展中的研究进展》文中研究指明转化生长因子-β是一种多肽类细胞因子,大部分由Foxp 3+调节性T细胞分泌。其通过TGF-β信号转导的Smad和非Smad途径在细胞生理病理过程中发挥重要作用。TGF-β信号通路功能障碍与肿瘤的发生发展关系密切。本文综述TGF-β在胃肠道不同肿瘤中的作用机制,将有望用于胃肠道肿瘤在分子水平的诊断和治疗。
刘锟荣,韦宜宾,陈国忠[7]（2014）在《Wnt/β-catenin、TGF-β/Smads及RAS/MARK信号通路与大肠癌关系的研究进展》文中提出大肠癌在全球癌症死因中排第3,在发达国家比在发展中国家发病率高,且病死率高[1]。随着国人生活节奏和饮食结构改变,大肠癌在我国的发病率逐渐上升。大肠癌发病的过程是多阶段多步骤的,相关信号通路异常改变在此起着决定性作用,而Wnt/β-catenin、TGF-β/Smads、RAS/MARK信号通路的异常改变在大肠癌发病中较为常见,并在大肠癌的发生发展和侵袭转移等过程中起重要作用,而且这3个信
王朝晖,张雪梅[8]（2011）在《大肠癌中转化生长因子βⅡ型受体及周期素D1表达关系的研究》文中认为[目的]研究转化生长因子β（TGF-β）Ⅱ型受体（TGF-βRⅡ）及周期素D1（Cyclin D1）在大肠癌、大肠腺瘤中的表达,探讨其在大肠癌发病中的作用机制。[方法]应用免疫组织化学SABC法,即应用兔抗人TGF-βⅡ单抗和鼠抗人Cyclin D1单抗,对56例大肠癌、29例大肠腺瘤及56例相应癌旁正常组织进行免疫组织化学染色。[结果]TGF-βRⅡ表达主要位于细胞膜和细胞质中,其在大肠癌中的阳性表达率（44.64%）明显低于大肠腺瘤组织和正常组织（82.76%和96.43%）。Cyclin D1表达主要位于细胞核,其在大肠癌中的阳性表达率（89.29%）明显高于大肠腺瘤组织（41.38%）,而正常大肠黏膜未见Cyclin D1强阳性表达。Cyclin D1过表达可明显降低TGF-βRⅡ的表达,二者呈明显的负相关。[结论]TGF-βRⅡ表达下降及Cyclin D1过表达可能在大肠癌发生过程中起重要作用。
张倩洁[9]（2011）在《转化生长因子β1及丁酸钠对大肠癌HCT-116细胞增殖影响的实验研究》文中指出目的:探讨转化生长因子β1（TGF-β1）及丁酸钠对大肠癌HCT-116细胞体外增殖的影响。方法:应用MTT比色法分析不同药物浓度对大肠癌HCT-116细胞增殖的影响;应用流式细胞仪分析不同药物浓度对结肠癌细胞周期的影响。结果:1、TGF-β1明显抑制大肠癌HCT-116细胞的增殖,同一作用时间细胞增殖抑制效应随着浓度的增加而增强;在同一药物浓度下,10ng/ml、20ng/ml两种浓度细胞抑制效应随作用时间的延长而增强;而当浓度为5ng/ml时,作用时间在24小时与48小时,抑制效应在统计学上无差异性（P>0.05）,但作用时间在72小时抑制效应均明显高于24小时与48小时（P<0.05）。2、丁酸钠明显抑制大肠癌HCT-116细胞的增殖,同一作用时间细胞增殖抑制效应随着浓度的增加而增强,在同一药物浓度下,0.5mmol/L、1mmol/L、2mmol/L三种浓度细胞抑制效应随作用时间的延长而增强（P<0.05）。3、TGF-β1（5ng/ml）与丁酸钠（0.5mmol/L）两药联合对大肠癌HCT-116细胞增殖的抑制效应明显增强（P<0.05）,抑制效应随时间延长而增强（P<0.05）;作用时间24、48和72小时,TGF-β1（5ng/ml）与丁酸钠（0.5mmol/L）联合用药对大肠癌HCT-116细胞增殖的抑制效应明显强于单独应用TGF-β1及丁酸钠（P<0.05）。4、TGF-β1（5ng/ml）、丁酸钠（0.5mmol/L）、TGF-β1（5ng/ml）与丁酸钠（0.5mmol/L）联合用药组G1期比例明显升高,与对照组比较,P<0.05,差别均具有统计学意义;S期和G2期比例明显下降,与对照组相比,P<0.05,差别均具有统计学意义。结论:1、TGF-β1可明显抑制大肠癌HCT-116细胞的增殖,且同一作用时间这种抑制效应随着浓度的增加而增强;TGF-β1通过影响细胞周期发挥对HCT-116细胞的生长抑制作用。2、丁酸钠可明显抑制大肠癌HCT-116的细胞增殖,其抑制效应随着时间延长和药物浓度的增加而增强;丁酸钠通过影响细胞周期发挥对HCT-116细胞的生长抑制作用。3、TGF-β1与丁酸钠联合用药对大肠癌HCT-116细胞增殖的抑制效应明显强于单独应用TGF-β1及丁酸钠;提示TGF-β1与丁酸钠对大肠癌细胞增殖抑制有协同作用。
李惠斌[10]（2011）在《TGF-β1及其Ⅱ型受体与肿瘤关系的研究进展》文中研究指明转化生长因子β是由免疫细胞和非免疫细胞分泌的一组多肽,TGF-β1是机体正常细胞及上皮肿瘤细胞生长的负调控因子。转化生长因子βⅡ型受体是存在于人类细胞膜表面的能与转化生长因子β1
二、转化生长因子βⅡ型受体与大肠癌（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、转化生长因子βⅡ型受体与大肠癌（论文提纲范文）
（1）结直肠癌微环境乳酸与巨噬细胞炎症小体的相关机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 RT-PCR |
| 1.2 主要的仪器和设备 |
| 1.3 主要试剂、耗材、抗体 |
| 1.4 主要实验试剂的配制 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 细胞培养基本技术 |
| 2.2 佛波酯(PMA)诱导THP-1细胞分化 |
| 2.3 细胞处理 |
| 2.4 质粒提取 |
| 2.5 细菌的处理 |
| 2.6 细胞瞬时转染 |
| 2.7 慢病毒感染细胞 |
| 2.8 实时荧光定量PCR(RT-PCR) |
| 2.9 蛋白质免疫印迹 |
| 2.10 ASC-GFP聚集实验 |
| 2.11 流式细胞仪测定ROS |
| 2.12 统计学分析 |
| 实验结果 |
| 1 佛波酯(PMA)诱导THP-1细胞分化 |
| 2 结直肠癌来源的乳酸可作为DAMP来诱导THP1来源的巨噬细胞中炎症小体的激活 |
| 3 乳酸可诱导NLRP3炎症小体的激活 |
| 4 乳酸通过上调ROS激活THP-1来源的巨噬细胞炎症小体 |
| 5 乳酸可诱导结直肠癌细胞中TGF-β的表达和分泌 |
| 6 TGF-β抑制乳酸诱导的THP-1来源的巨噬细胞中炎症小体的活化 |
| 7 TGF-β抑制经典配体诱导的THP-1来源巨噬细胞中炎症小体激活 |
| 8 TGF-β通过TGF-β R1抑制炎症小体的激活 |
| 9 SMAD信号通路可介导TGF-β对炎症小体的抑制作用 |
| 10 TGF-β可能通过SMAD-自噬-ROS轴抑制炎症小体激活 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 肿瘤相关巨睡细胞的研究进展 |
| 参考文献 |
| 英文缩略词表 |
| 在读期间已发表和待发表的论文 |
| 致谢 |
（2）基于上皮间质转化探讨复方苦参注射液防治放射性肺损伤的机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 放射性肺损伤的中医理论探讨 |
| 1 中医学对放射性肺损伤病名的认识 |
| 2 中医学对放射性肺损伤病因的认识 |
| 3 中医学对放射性肺损伤病机的认识 |
| 4 中医学对放射性肺损伤病理特点的认识 |
| 5 放射性肺损伤治疗原则浅析 |
| 6 放射性肺损伤中医治法浅析 |
| 7 选方分析 |
| 8 参考文献 |
| 第二部分 现代医学对放射性肺损伤的认识 |
| 1 放射性肺炎 |
| 2 放射性肺纤维化 |
| 3 放射性肺损伤西医治疗 |
| 4 EMT |
| 5 EMT的发病因素 |
| 6 与EMT相关的转录因子 |
| 7 调节EMT的部分信号通路 |
| 8 复方苦参注射液对EMT中 TGF-β/Smads和 Wnt/β-catenin信号通路的协同作用 |
| 9 选方分析 |
| 10 参考文献 |
| 第三部分 实验部分 |
| 实验一 放射性肺损伤小鼠模型的建立及评价 |
| 1 引言 |
| 2 实验材料 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 讨论 |
| 6 参考文献 |
| 实验二 复方苦参注射液对小鼠放射性肺损伤肺组织病理形态学的影响 |
| 1 引言 |
| 2 实验材料 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 讨论 |
| 6 参考文献 |
| 实验三 复方苦参注射液对放射性肺损伤小鼠肺组织EMT相关的表型标记物E-cadheren、Vimentin表达的影响 |
| 1 引言 |
| 2 实验材料 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 讨论 |
| 6 参考文献 |
| 实验四 复方苦参注射液对小鼠放射性肺损伤血清中TNF-α和TGF-β1 表达的影响 |
| 1 引言 |
| 2 实验材料 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 讨论 |
| 6 参考文献 |
| 实验五 复方苦参注射液对放射性肺损伤小鼠肺组织TGF-β/Smads和Wnt/β-catenin信号通路的影响 |
| 1 引言 |
| 2 实验材料 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 讨论 |
| 6 参考文献 |
| 结语 |
| 附录 |
| 综述一 |
| 参考文献 |
| 综述二 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间参与课题和发表论文情况 |
| 致谢 |
（3）基于TGF-β/Smads信号通路研究内异痛经灵治疗子宫内膜异位症的作用机理（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药品 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器和设备 |
| 2 试验方法 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 模型制作 |
| 2.2.1 造模方法 |
| 2.2.2 造模成功的评定标准 |
| 2.3 给药 |
| 2.4 标本提取及处理 |
| 2.5 观察指标 |
| 2.6 观察方法 |
| 2.6.1 大鼠异位病灶体积测定 |
| 2.6.2 大鼠异位内膜形态学观察 |
| 2.6.3 免疫组化法检测各组内膜组织中TGF-β1、TβRⅠ、Smad2/3、Smad7 的蛋白表达 |
| 2.6.4 免疫印迹法检测各组内膜组织中TGF-β1、TβRⅠ、Smad2/3、Smad7 的蛋白表达 |
| 3 实验步骤 |
| 3.1 组织切片制作 |
| 3.2 HE染色 |
| 3.2.1 实验步骤 |
| 3.2.2 图像采集 |
| 3.3 免疫组化 |
| 3.3.1 SP三步法 |
| 3.3.2 结果判读 |
| 3.4 免疫印迹法 |
| 3.4.1 总蛋白提取 |
| 3.4.2 样本蛋白浓度测定 |
| 3.4.3 电泳前处理 |
| 3.4.4 凝胶电泳 |
| 3.4.5 转膜 |
| 3.4.6 免疫反应 |
| 3.4.7 化学发光 |
| 3.4.8 凝胶图像分析 |
| 4 统计学方法 |
| 5 实验结果 |
| 5.1 造模后大鼠一般情况 |
| 5.1.1 成模情况 |
| 5.1.2 造模后大鼠的行为观察 |
| 5.2 各组EMs大鼠异位内膜体积变化比较 |
| 5.3 各组大鼠内膜组织形态学观察 |
| 5.4 免疫组化法检测各组EMs大鼠各蛋白表达量的比较 |
| 5.4.1 免疫组化法检测各组EMs大鼠TGF-β1 蛋白表达量的比较 |
| 5.4.2 免疫组化法检测各组EMs大鼠TβRⅠ蛋白表达量的比较 |
| 5.4.3 免疫组化法检测各组EMs大鼠Smad2/3 蛋白表达量的比较 |
| 5.4.4 免疫组化法检测各组EMs大鼠Smad7 蛋白表达量的比较 |
| 5.5 免疫印迹法检测各组EMs大鼠各蛋白表达量的比较 |
| 5.5.1 免疫印迹法检测各组EMs大鼠TGF-β1 蛋白表达量的比较 |
| 5.5.2 免疫印迹法检测各组EMs大鼠TβRⅠ蛋白表达量的比较 |
| 5.5.3 免疫印迹法检测各组EMs大鼠Smad2/3 蛋白表达量的比较 |
| 5.5.4 免疫印迹法检测各组EMs大鼠Smad7 蛋白表达量的比较 |
| 讨论 |
| 1 西医对内异症的认识 |
| 1.1 西医对内异症发病机制的研究 |
| 1.2 TGF-β/Smads信号通路与EMs的关系 |
| 1.2.1 TGF-β/Smads信号通路简介 |
| 1.2.2 TGF-β/Smads信号通路与EMs |
| 1.2.3 TGF-β1与EMs的关系 |
| 1.2.4 Smads与 EMs的关系 |
| 1.3 关于EMs的西医治疗 |
| 2 中医对内异症的认识 |
| 2.1 中医有关内异症的记载 |
| 2.2 中医关于内异症病因病机的认识 |
| 3 内异痛经灵的选方依据及组成分析 |
| 4 孕三烯酮的选药依据 |
| 5 免疫组化与免疫印迹两种实验方法的选择依据 |
| 6 实验结果分析 |
| 6.1 大鼠异位病灶体积变化 |
| 6.2 HE染色 |
| 6.3 异位内膜组织中TGF-β1、TβRⅠ、Smad2/3、Smad7 的蛋白表达 |
| 7 存在的问题与展望 |
| 7.1 存在的问题 |
| 7.2 展望 |
| 结论 |
| 中英文缩略表 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 个人简历及攻读学位期间获得的科研成果 |
| 致谢 |
（4）上皮间质转化的相关生物标志物在大肠癌中的研究进展（论文提纲范文）
| 1 E-cadherin |
| 1.1 E-cadherin 的结构 |
| 1.2 E-cadherin 与大肠癌 |
| 2 β-catenin |
| 2.1 β-catenin的结构 |
| 2.2 β-catenin与大肠癌 |
| 3 Vimentin |
| 3.1 Vimentin的结构 |
| 3.2 Vimentin与大肠癌 |
| 4 TGF-β1 |
| 4.1 TGF-β1的结构 |
| 4.2 TGF-β1与大肠癌 |
| 5 PAK1 |
| 5.1 PAK1的结构 |
| 5.2 PAK1与大肠癌 |
| 6 小结与展望 |
（5）激活素A在人大肠癌组织中的表达及其作用研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 激活素及其功能 |
| 1.1.1 激活素的来源 |
| 1.1.2 激活素的结构及分类 |
| 1.1.3 激活素A调节卵泡颗粒细胞的分化 |
| 1.1.4 激活素A在炎症中的作用 |
| 1.1.5 激活素A参与创伤修复 |
| 1.1.6 激活素A在肝脏中的作用 |
| 1.1.7 激活素A在神经系统中的作用 |
| 1.1.8 激活素A在呼吸系统中的作用 |
| 1.1.9 激活素A在肿瘤中的作用 |
| 1.2 激活素的传导及调节 |
| 1.2.1 激活素的受体及传导 |
| 1.2.2 激活素受体下游的信号分子Smads |
| 1.2.3 卵泡抑素及卵泡抑素相关蛋白 |
| 1.3 大肠癌的发病机制及研究进展 |
| 1.3.1 大肠癌的发生 |
| 1.3.2 大肠癌的分子分型 |
| 1.3.3 其他与大肠癌相关的基因 |
| 1.3.4 大肠癌的转移 |
| 1.4 激活素A在大肠组织中的表达及其可能的作用 |
| 1.5 大肠癌的筛查 |
| 1.5.1 粪便检查 |
| 1.5.2 内镜和放射线检查 |
| 1.6 主要研究思路及研究特色 |
| 1.6.1 研究思路 |
| 1.6.2 本研究的特色 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 组织材料 |
| 2.1.1 大肠癌、大肠良性息肉组织及血清标本 |
| 2.1.2 细胞 |
| 2.2 试剂的配制 |
| 2.2.1 磷酸盐缓冲液的配制 |
| 2.2.2 抗体稀释液的配制 |
| 2.2.3 洗液的制备 |
| 2.2.4 DAB贮液的配制 |
| 2.2.5 PVDF膜封闭液的配制 |
| 2.2.6 分离胶的配制 |
| 2.2.7 上样缓冲液（2×Loading buffer）的配制 |
| 2.2.8 洗液（TBST）的配制： |
| 2.2.9 封闭液的配制： |
| 2.2.10 抗体稀释液的配制 |
| 2.3 主要仪器及设备 |
| 2.4 实验方法 |
| 2.4.1 RT-PCR |
| 2.4.2 ELISA |
| 2.4.3 免疫组织化学染色 |
| 2.4.4 Western blotting |
| 2.4.5 SW480细胞表达激活素A检测 |
| 2.4.6 流式细胞术 |
| 2.4.7 吉姆萨染色 |
| 2.4.8 MTT法测定细胞活力 |
| 2.4.9 SW480细胞瞬时转染Smad3 shRNA表达质粒及Smad3过表达质粒 |
| 2.5 统计学分析 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 大肠癌患者血清及组织中的激活素A水平变化 |
| 3.1.1 健康对照者及患者临床资料分析 |
| 3.1.2 健康对照者、大肠良性息肉患者及大肠癌患者血清激活素A水平 |
| 3.1.3 大肠癌及大肠息肉患者血清激活素A的ROC曲线 |
| 3.1.4 激活素A与癌胚抗原对大肠癌检测的敏感度及特异度对比 |
| 3.1.5 大肠癌患者术前与术后血清激活素A水平比较 |
| 3.1.6 不同分期的大肠癌患者血清激活素A水平比较 |
| 3.1.7 大肠癌组织及大肠良性息肉组织中激活素A mRNA水平 |
| 3.1.8 大肠癌及大肠良性息肉组织中激活素A蛋白的表达 |
| 3.1.9 激活素A在大肠癌组织中的表达 |
| 3.2 激活素A对大肠癌细胞系SW480的作用 |
| 3.2.1 SW480细胞系中激活素A的表达水平 |
| 3.2.2 激活素A对大肠癌细胞系SW480细胞活力的影响 |
| 3.2.3 SW480细胞吉姆萨染色 |
| 3.2.4 激活素A诱导大肠癌细胞系SW480细胞凋亡 |
| 3.2.5 激活素II型受体及信号分子Smad3在SW480细胞的表达 |
| 3.3 Smad3敲低对激活素A诱导SW480细胞凋亡的影响 |
| 3.3.1 Smad3基因敲低效果检测 |
| 3.3.2 Smad3基因敲低对激活素A诱导SW480细胞凋亡的影响 |
| 3.4 Smad3过表达对激活素A诱导的SW480细胞凋亡的作用 |
| 3.4.1 Smad3基因过表达效果检测 |
| 3.4.2 Smad3过表达对激活素A诱导SW480细胞凋亡的影响 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 本研究的必要性 |
| 4.2 激活素A在大肠癌患者体内的表达 |
| 4.3 激活素A在大肠癌中的作用 |
| 4.4 激活素A对大肠癌作用的信号转导 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（6）TGF-β在胃肠道肿瘤发生发展中的研究进展（论文提纲范文）
| 1 TGF-β信号通路概述 |
| 1.1 TGF-β信号转导的Smad和非Smad途径 |
| 1.2 Smads蛋白 |
| 1.3 TGF-β受体 |
| 2 TGF-β信号通路调控因素 |
| 2.1 TGF-β受体活化的调节 |
| 2.2 R-Smad的调节 |
| 2.3 I-Smad的调节 |
| 3 TGF-β信号通路与胃肠肿瘤发生、发展 |
| 3.1 与胃癌发生发展 |
| 3.2 与大肠癌发生发展 |
（7）Wnt/β-catenin、TGF-β/Smads及RAS/MARK信号通路与大肠癌关系的研究进展（论文提纲范文）
| 1 Wnt/β-catenin信号通路在大肠癌中的异常改变 |
| 1.1 关键蛋白Axin2、APC、β-catenin在大肠癌中的异常改变 |
| 1.2 该信号通路在大肠癌中还受其他蛋白的影响 |
| 2 TGF-β/Smads信号通路在大肠癌中的异常改变 |
| 2.1 TGF-β在大肠癌中的异常改变 |
| 2.2 TGF-β受体在大肠癌中的异常改变 |
| 2.2.1 TGF-βⅡ型受体在大肠癌中的异常改变 |
| 2.2.2 TGF-βⅠ型受体在大肠癌中的异常改变 |
| 2.3 Smads在大肠癌中的异常改变 |
| 2.3.1 Smad4在大肠癌中的异常改变 |
| 2.3.2 Smad2及Smad3在大肠癌中的异常改变 |
| 3 RAS/MAPK信号通路的主要变异及与大肠癌的关系 |
| 3.1 RAS在大肠癌中的改变 |
| 3.2 B-RAF在大肠癌中的改变 |
| 4 3个信号通路在大肠癌发病中相互作用 |
| 5 3个信号同路与大肠癌预后及干预治疗最新研究 |
| 6 结论与展望 |
（8）大肠癌中转化生长因子βⅡ型受体及周期素D1表达关系的研究（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 研究方法 |
| 1.3 结果判断 |
| 1.4 统计学处理方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 TGF-β R Ⅱ在大肠良、恶性肿瘤组织中表达的特点 |
| 2.2 Cyclin D1在大肠良、恶性肿瘤组织中的表达 |
| 2.3 大肠癌Cyclin D1过表达与TGF-β RⅡ表达之间的关系 |
| 3 讨论 |
（9）转化生长因子β1及丁酸钠对大肠癌HCT-116细胞增殖影响的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 结果 |
| 1、不同浓度 TGF-β1 对大肠癌 HCT-116 细胞增殖的影响 |
| 2、不同浓度丁酸钠对大肠癌 HCT-116 细胞增殖的影响 |
| 3、TGF-β1(5ng/ml)与丁酸钠(0.5mmol/L)联合用药组对大肠癌 HCT-116 细胞 增殖的影响 |
| 4、不同药物作用 48 小时后,大肠癌 HCT-116 细胞增殖周期改变 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（10）TGF-β1及其Ⅱ型受体与肿瘤关系的研究进展（论文提纲范文）
| 1 TGF-β1以及TβR的结构、信号传导 |
| 2 TGF-β1与肿瘤 |
| 3 TβR-Ⅱ与肿瘤 |
| 4 问题与展望 |
四、转化生长因子βⅡ型受体与大肠癌（论文参考文献）
- [1]结直肠癌微环境乳酸与巨噬细胞炎症小体的相关机制研究[D]. 胡滢. 南方医科大学, 2021(02)
- [2]基于上皮间质转化探讨复方苦参注射液防治放射性肺损伤的机制[D]. 王文龙. 湖北中医药大学, 2020(08)
- [3]基于TGF-β/Smads信号通路研究内异痛经灵治疗子宫内膜异位症的作用机理[D]. 李二云. 广西中医药大学, 2019(03)
- [4]上皮间质转化的相关生物标志物在大肠癌中的研究进展[J]. 孙红梅,武金宝. 包头医学院学报, 2019(03)
- [5]激活素A在人大肠癌组织中的表达及其作用研究[D]. 吴双. 吉林大学, 2016(08)
- [6]TGF-β在胃肠道肿瘤发生发展中的研究进展[J]. 王付钦,乌新林. 内蒙古医科大学学报, 2016(02)
- [7]Wnt/β-catenin、TGF-β/Smads及RAS/MARK信号通路与大肠癌关系的研究进展[J]. 刘锟荣,韦宜宾,陈国忠. 广东医学, 2014(17)
- [8]大肠癌中转化生长因子βⅡ型受体及周期素D1表达关系的研究[J]. 王朝晖,张雪梅. 中国中西医结合消化杂志, 2011(02)
- [9]转化生长因子β1及丁酸钠对大肠癌HCT-116细胞增殖影响的实验研究[D]. 张倩洁. 大连医科大学, 2011(06)
- [10]TGF-β1及其Ⅱ型受体与肿瘤关系的研究进展[J]. 李惠斌. 山东医学高等专科学校学报, 2011(01)
标签：大肠癌论文; 复方苦参注射液论文; 转化生长因子-β论文; 细胞生长因子论文; 血清蛋白论文;